花青素提取.docVIP

桑椹酒渣中花青素提取 1材料与方法 1.1材料 桑椹果酒酒渣。 1.2试剂药品 试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。 1.3主要仪器 电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。 1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取） 样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀） 以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于0、0、0、0、0℃下提取1h固定浸提温度、提取时间、液料比，分别为提取剂进行浸提试验，色 素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.20.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液λmax和700处的吸光值A。按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。λmax 的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。 2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。 分别称取g酒渣，按液料比5、10、15、20、25、30加入相应体积的浸提溶剂，在40℃下避光提取2h后，抽滤、离心(3000m，10min)。取1mL清液，用pH 和pH 的缓冲溶液稀释(吸光值在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对液料比作图，分析液料比对色素提取量的影响。 分别称取置入5个50mL的三角瓶中，各加入浸提溶剂，搅拌5 min，用封口膜将瓶口密封并用铝箔纸包裹好以避光。分别置于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃的恒温水浴上提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，min)。取1L上清液，用pH 和pH 的缓冲液稀释(吸光值在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对温度作图，分析温度对色素提取量的影响。用pH 和pH 的缓冲液稀释(吸光值在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700处处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对时间作图，分析提取时间对色素提取量的影响。根据单因素试验的结果，选取L(34)正交试验表，以浸提溶剂中乙醇浓度、浸提时 间、浸提温度、液料比为因素，安排4水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。 方法二超声波辅助提取桑椹红色素精确称取2.0g桑椹若干份，按液料比分别加入提取液，在30℃温度下，分别以200～700 W超声功率萃取20min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH和pH缓冲液稀释(吸光值控制在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声功率作图，分析功率对色素提取量的影响。2超声温度对色素提取量的影响 精确称取2.0g桑椹若干份，按液料比分别加入提取液，以W超声功率分别在20～60℃温度下萃取20min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH和pH缓冲溶液稀释(吸光值在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700姗处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声温度作图，分析温度对色素提取量的影响。3超声时间对色素提取量的影响 精确称取2.0g桑椹若干份，按液料比分别加入提取液，在℃温度下，以W超声功率分别萃取5、10、15、20、25、30min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH和pH缓冲溶液稀释(吸光值在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声时间作图，分析时间对色素提取量的影响。4桑椹红色素超声波辅助提取条件的正交试验 根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以超声功率、超声温度、超声时间为因素，安排3水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。方法三辅助提取桑椹红色选择微波辅助提取温度30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ , 以微波功率500W、600W、700W、800W、900W,微波辐射时间2S、4S、6S、8S、10S以及液料比10:1、20:1、30:1、40:1、50:1为考察因素. 方法三超高压辅助提取桑椹红色1 压力对色素提取量的影响 精确称取2.0g桑椹若干份放入超高压处理袋内，按液料比分别加入提取液，封口包装；以不同压力～500MPa进行加压3min，加压1次的处理。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH和pH缓冲溶液稀释(吸光值在～之间)，分别测定两种样品稀释液在λmax和700处的吸光值A，按公