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第六章 生化工程 主讲人:黄 循 吟 一、概述 问题:1、什么是生化工程?它的研究对象、内容是什么? 2、生化工程在生物工程技术开发及产业化中有什么地位? 3、生化工程是怎样诞生并发展起来的? 4、什么是工业生物技术? 5、生物生产过程包括哪些部分? 6、生化工程的基本内容是什么? 生化工程:是研究发酵及酶反应过程中一些共性的工程技术问题和基础理论问题的学科,是生物科学与化学工程相结合的交叉学科。 它是以化学工程的原理及方法研究含生物物系或生化反应的工业生产中的有关问题。特别是解决将生物技术的实验室研究成果转化为生产过程 时所出现的一系列工程技术问题。 它研究对象、内容是: 1)、生产过程中培养基及生产设备——的灭菌问题; 2)、大量空气的—除菌问题; 3)、好氧培养过程中氧的需求及传递—通风搅拌问题; 4)、分批培养中的发酵动力学或酶动力学问题; 5)、生物反应器的设计放大问题; 6)、生物产品的大量提取问题; 7)、生化反应过程的参数检测及控制等问题。 这些问题的解决,对生物工程特别是基因工程、细胞工程及酶工程新成果的开发将起着保证的作用,同时对现有的发酵工业的技术改造也产生积极的作用。因此,生化工程的研究是整个生物工程技术开发及产业化中一个不可缺少的环节。是生物工程的一个重要组成部分。 生化工程的诞生和发展: 随着生物技术的发展,生化工程的研究将向以下四个方面发展: 一是新型生物反应器的研究开发及相应培养、发酵技术的研究; 二是新型分离方法和设备的研究开发; 三是各种描述生物反应过程的数学模型的建立; 四是生产过程在线检测和控制手段的完善。 生物技术根据应用范围不同,可分为工业生物技术,农业生物技术和医学生物技术三大方面。以生化工程来说,主要是为工业生物技术服务。 工业生物技术:主要是利用生物催化剂(游离或固定化的细胞的酶),将原料转化为产物(包括医药,化工、轻工、食品等产品)的生产过程—生物生产过程或用于环保和能源的过程。 在生产过程中,当过程 采用游离的整体微生物细胞时,一般称为发酵过程(特定条件下,也称为微生物学培养或微生物转化过程等)。 当生物催化剂为游离酶或固定化酶时,此过程 则称为酶反应过程或酶促反应过程 。 另外,利用动、植物细胞称为动植物细胞(组织)的培养过程。 用于进行污水处理称为污水处理过程。 生物生产过程: 生物生产过程具有以下特点: 1)、由于生物催化剂易于失活,易受环境的影响和杂菌污染,一般不能长时间使用,因此以分批培养方式为主; 2)、原材料为天然生物物质,来源丰富,价格低廉,过程中的废物危害较小,但原料成分往往难以控制,给生产控制和产品质量带来一定的困难和影响; 3)、与化学反应相比,生产设备较为简单,能量消耗一般也较少,但过高底物或产物浓度常常导致酶的抑制或细胞失活; 4)、所用的反应器体积很大,要求在无菌条件下进行操作; 5)、酶反应过程的专一性强,转化率高,但酶 的成本高; 6)、发酵过程 的成本低,应用广,但反应周期长,较难控制,反应液中杂质多,给分离纯化带来困难。 生化工程的基本内容: 前面我们讨论过,生化工程研究的是生物反应的生产过程中带有共性的技术问题,对于生物生产过程中的三大部分,生化工程的基本内容也有三个方面: 一是在上游加工过程中,最重要的是提供和制备高产优质和足够数量的生物催化剂。其中的共性问题是大规模的种子培养、酶或细胞的固定化、如何将这些种子或酶移入生物反应器等。另外原料加工后的基质或培养基标准化以及灭菌和空气除菌问题; 二是在生物反应过程 中,有关的共性问题是反应器的类型;操作方式及条件的确定;过程及反应器的放大;过程的参数检测和控制等问题; 三是在下游过程中,主要是研究和开发适用于生物反应产品,特别是作为诊断和治疗用的活性蛋白质、多肽或其它活性物质的提取、精制和装备等内容。对于生产药品和食品过程中,还应注意符合“优质生产规范”的要求。 二、培养基的灭菌和空气除菌技术 1、培养基的灭菌技术: 工业上,培养基的灭菌一般都采用蒸汽加热灭菌,灭菌所需时间与培养基及其中杂菌的性质、含菌量以及灭菌温度有关。工业上常用高温快速方法进行灭菌,以保留更多的营养成分。工业上实际使用的蒸汽灭菌方法有两种: 1)、实罐灭菌(即分批灭菌):将配好的培养基放入发酵罐,连同发酵进行灭菌。 开始时,蒸汽先通过夹层或蛇管间接加热,以免过多的冷凝水稀释培养基。待罐温达到80-90。C时,可以直接将蒸汽通入培养基,直至达到灭菌温度。此时,有关阀门仍适当开启,以使蒸汽流动畅通,消灭“死角”,并同时对附管道进行灭菌。灭菌完毕后,应及时通入无菌空气使罐内维持正压,然后通过夹层或蛇管将培养基尽可能快冷却。 2)、连续灭菌:将配好的培养基先加热到60-75。C后用泵连续输入由蒸汽直
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