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韭子对老年小鼠免疫功能影响的实验研究 【摘要】 目的 研究韭子水煎剂对老年小鼠免疫功能的影响。方法 以韭子水煎剂灌胃老年小鼠30 d，应用流式细胞技术检测小鼠T淋巴细胞亚群、放射免疫方法检测血清白介素2（IL2）含量，ELISA方法检测血清中免疫球蛋白G（IgG）的含量。结果　老年组脾脏T淋巴细胞亚群比例失调，血清IL2和IgG含量下降；老年韭子水煎剂治疗组脾脏T淋巴细胞亚群由失衡恢复到平衡，血清IL2和IgG含量提高。结论 韭子水煎剂具有恢复老年小鼠免疫功能的作用。 【关键词】 韭子水煎剂；老年小鼠；免疫功能 　中药韭子为百合科植物韭的种子，含有生物碱、挥发油、皂甙、硫化物、蛋白质、氨基酸、油脂、维生素C等成分。研究表明，中药韭子具有补肝肾，暖腰膝，壮阳，抗炎抑菌、祛痰等药理作用〔1〕，并能增强小鼠非特异性免疫和体液免疫功能〔2〕。但对老年个体的免疫功能调节作用目前尚未见报道。本实验通过检测老年小鼠T淋巴细胞亚群，IL2活性以及IgG含量，探讨韭子对老年小鼠免疫功能的影响。 　　1 材料与方法 　　11　材料 　　韭子购于佳木斯市药材公司。抗小鼠CD3、抗小鼠CD4、抗小鼠CD8单克隆抗体（McAb）：北京医科大学免疫系。IL2试剂盒：解放军总医院科技开发中心放免所；IgG ELISA检测试剂盒：北京邦定生物试剂公司。 　　12 对象 　　健康昆明种小鼠来自本校实验动物中心，30只,雌雄各半，青年组(2月龄)10只,体重（20±2）g,老年组(12月龄)20只,体重(50±5）g。 　　13 方法 　　131 中药制备 　　韭子50 g，按传统方法水煎煮2次，合并两次滤液后加热浓缩制成含生药量为1 g/ml的韭子水煎液。 　　132 实验分组 　　实验分为三组,青年组10只，老年组10只,老年韭子水煎剂治疗组10只。治疗组根据每鼠体重灌胃给予韭子水煎剂05 ml（124 g/kg）每日1次〔2〕;老年组、青年组,灌服生理盐水05 ml/只，每日1次。连续30 d后，取小鼠眼球血，离心分离血清，冻存，待检；小鼠断髓处死，无菌取脾，于Hanks液中研碎，制成1×106/ml脾细胞悬液。 　　14 指标检测 　　141 T淋巴细胞亚群测定 　　将脾细胞悬液分别加入2个试管内，1 ml/管。第1管加入FITC标记的抗小鼠CD3+单克隆抗体40 μl、第二管同时加入PE标记的抗小鼠CD4+单克隆抗体和FITC标记的抗小鼠CD8+单克隆抗体各20 μl，作用30 min后，加入1 ml荧光洗液，2 200 r/min离心5 min，去上清。加入1 ml荧光保存液，流式细胞仪检测106个细胞中各细胞亚群的百分率。 　　142 血清IL2的检测 　　采用放射免疫法测定法，按试剂盒说明书操作。 　　143 血清IgG检测 　　ELISA法，按试剂盒说明书操作。 　　15 统计学处理 　　实验各项指标以x±s表示，通过SPSS100软件进行统计学处理，组间进行方差分析、q检验。 　　2 结果 　　21 韭子水煎剂对老年小鼠T淋巴细胞亚群的影响 　　见表1。老年组与青年组比较，CD4+ 亚群的比例、CD4+/CD8+的比值明显降低，统计学有显著性差异（P＜005），说明模型成功；应用韭子水煎剂治疗后，治疗组CD4+亚群和CD4+/CD8+的比值与青年组比较无明显差异（P＞005）。表1 韭子水煎剂对衰老小鼠脾脏T淋巴细胞 亚群功能的影响(略) 　　22 韭子水煎剂对老年小鼠血清IL2和IgG含量的影响 　　见表2。老年组与青年组比较，血清IL2和IgG水平明显降低，具有显著性差异（P＜005），说明模型成功；应用韭子水煎剂治疗后，治疗组与青年组比较，血清IL2和IgG含量水平无明显差异（P＞005）。 表2 韭子水煎剂对小鼠血清IL2的影响(略) 　　3 讨论 　　在衰老个体，免疫器官出现萎缩,淋巴细胞总数下降,各亚群的功能也降低,CD4细胞和CD8细胞比例改变,表面的CD4受体和CD8受体的密度也下降；淋巴细胞分泌的细胞因子如IL2的含量也发生了改变，造成个体一生中第二个发病高峰〔3〕。通过本实验证明,韭子水煎剂能调整衰老个体T淋巴细胞亚群的失衡，起到了恢复细胞免疫功能的作用。并通过提高IL2和IgG水平，进一步的调整了衰老小鼠细胞免疫功能和体液免疫功能。T细胞介导细胞免疫，Th细胞(CD4+)和TS细胞(CD8+)的相互协调是调控的重要环节之一。 　　CD4+/ CD8+的比值反应机体免疫内环境是否稳定的一个重要指标,两者平衡决定了免疫反应的总效应,若1