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生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清IL 作者：高玉峰，李素婷，段一娜 ，宋鸿儒 【关键词】 生黄合剂；,,病毒性心肌炎；,,细胞因子 　　摘要：目的观察生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清IL2及IL10的影响。方法对昆明种小鼠采用柯萨奇病毒（CVB3）腹腔注射染毒，制成病毒性心肌炎动物模型，观察生黄合剂对模型鼠的一般情况、生存率及IL2及IL10的影响。结果各治疗组小鼠的生存率明显高于病毒对照组，实验所试药物对CVB3感染鼠均有保护作用，生黄合剂1∶1，1∶2组对感染鼠的治疗作用要好于阳性药物组，尤其是1∶1液组的治疗作用最佳；生黄合剂对模型鼠血清IL2及IL10有调节作用。结论 生黄合剂对实验性病毒性心肌炎小鼠具有治疗作用。 　　关键词：生黄合剂； 病毒性心肌炎； 细胞因子 　　近年来病毒性心肌炎（viral myocarditis，VMC）的发病率呈上升趋势,已成为临床的常见病和多发病。肠道病毒中的柯萨奇病毒B组（coxsackievirus B3，CVB3）是引起病毒性心肌炎的主要病原体，调查表明病毒性心肌炎患者中有近50%的是由CVB3感染所致［1］。VMC的发病主要与病毒直接损伤心肌细胞、免疫损伤及生化机制有关。目前对该病的治疗仍缺乏有效手段。生黄合剂由黄芩茎叶总黄酮和传统名方生脉饮组成。预试验证明生黄合剂具有较好的抗病毒作用。本研究观察了生黄合剂对实验性小鼠病毒性心肌炎的作用，为临床试验及进一步探讨其作用机制提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 CVB3病毒Nancy株由河北医科大学微免教研室惠赠。在Hela细胞上传代，反复冻融3次，用微量法测定其半数组织感染量（TCID50）为10-5.5。实验动物为180只4～5周龄昆明种小鼠，雌雄各半，体重16～18g，二级实验动物，由山西医科大学实验动物中心提供。中药配制：生脉饮（人参∶五味子∶麦冬=1∶2∶1）与总黄酮（承德医学院中药研究所提供）按不同比例制成1∶1，1∶2合剂。利巴韦林注射液（0.1 g/ml济南利民制药有限责任公司）。 　　1.2 方法 将小鼠随机等分为6组，每组30只。A组为生脉饮治疗组；B组为1∶1液治疗组；C组为1∶2液治疗组；D组为阳性药物对照组；E组为病毒对照组；F组为正常对照组。A～E组腹腔注射1000TCID50/0.1 ml的CVB3 0.1 ml，F组腹腔注射RPMI 1640维持液0.1 ml，1 h后A～C组灌胃给药，0.2 ml/10 g，D组利巴韦林0.1 ml/10 g（80 mg/kg）腹腔注射，F组给予相同剂量的生理盐水灌胃，2次/d，持续给药10 d，观察14 d。分别于第7，14 d每组随机抽取6只小鼠摘眼球取血，分离血清，用ABC-HRP夹心ELISA法（试剂盒购自美国Biosouce公司）测定其IL2和IL10的水平变化。实验数据以±s表示，采用SPSS11.0统计软件进行方差分析、SNK检验，卡方检验，检验水准α=0.05。 　　2 结果 　　2.1 小鼠一般情况及生存率 F组小鼠活动自如，无一例死亡。A～D组小鼠的一般情况好于E组，E组小鼠在接种CVB3后第3天开始死亡，主要集中在第6～10天，而A～D组小鼠的死亡时间推迟到第6天，第14天各组小鼠存活情况见表1。A～D组与E组之间有统计学差异（χ2=40.11，P＜0.005）,A组与B组之间有统计学差异（χ2=4.46，P＜0.05）,B组和C组分别与D组比较均有统计学差异（χ2=10.24，χ2=5.33，P＜0.05）。结果表明实验所试药物对CVB3感染鼠均有保护作用，B、C组对感染鼠的保护和治疗作用要好于D组，尤其是1∶1液组的保护和治疗作用最佳。结果见表1。 　　表1 各组小鼠染毒第14天的存活率比较（略） 　　与E、F组比较，aP＜0.005；与D组比较，b P＜0.05；与A组比较，c P=0.035 　　2.2 细胞因子检测 在接种CVB3后第7，14天各组小鼠血清中IL-2和IL-10的测定结果见表2~3。用析因方差分析对不同时间小鼠血清中IL-2浓度进行比较（F=4.211，P＜0.005），不同时间与分组之间存在交互作用,然后分析不同时间的单独效应。接种病毒后第7天各组小鼠血清中IL-2水平比较有统计学差异（F=7.427，P＜0.05）,生脉饮组、1∶1液组和1∶2液组与病毒对照组相比有统计学差异(P＜0.05)；第14天各组小鼠的血清中IL-2水平比较有统计学差异（F=11.529，P＜0.005），1∶1液组小鼠的血清中IL-2水平低于病毒对照组(0.01＜P＜0.05)。同样用析因方差分析对不同时间小鼠血清中IL-10浓度进行比较