第2章 酶新2解析.ppt

酶动力学的双倒数图线 酶抑制剂的影响 1.概念：凡是使酶的必需基团或酶活性部位中的化学性质改变而降低酶活性甚至使酶完全丧失活性的物质称为抑制剂。用“I”表示。 抑制剂对酶的作用称为抑制作用。 区别于酶的变性 抑制剂对酶有一定选择性，而变性的因素对酶没有选择性 2 抑制作用的类型 不可逆抑制作用 可逆抑制作用 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) (1) 不可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活，不能用透析、超滤等方法予以除去。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 路易士气 失活的酶 巯基酶 失活的酶 酸 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物 （2） 可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 * 类型 ① 竞争性抑制作用 定义 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。 竞争性抑制 * 特点 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及［S］； I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 动力学特点：Vmax不变，表观Km↑。 抑制剂↑ 无抑制剂 1/v 1/[S] * 举例 1.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 2. 磺胺药对细菌FH2合成酶的抑制 3. 抗代谢物的抗癌作用 竞争性抑制曲线 竞争性抑制中， Vmax不变， Km增大，即达到相同最大速度所需的底物浓度增多。 2. 非竞争性抑制 　　抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系。　 非竞争性抑制作用 实例：重金属离子（Cu2+、Hg2+、Ag+、Pb2+） 金属络合剂（EDTA、F-、CN-、N3-） 这种抑制作用不能用增加底物浓度 的方法来消除。 非竞争性抑制 * 特点 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合； 抑制程度取决于［I］； 动力学特点：Vmax↓，表观Km不变。 抑制剂↑ 1/v 1/[S] 无抑制剂 非竞争性抑制曲线 非竞争性抑制中，Vmax变小， Km不变，即在底物浓度不变情况下，降低了反应的最大速率。 2. 反竞争性抑制 　　抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物结合，使ES的量下降。 反竞争性抑制作用 作用特点：酶只有与底物结合后，才能与抑制剂结合。 相对专一性 　　酶作用于一类化合物或一种化学键。 　　如： 消化道内几种蛋白酶的专一性 （芳香） （硷性） （丙） 胰凝乳蛋白酶 胃蛋白酶 弹性蛋白酶 羧肽酶 胰蛋白酶 氨肽酶 羧肽酶 消化道蛋白酶作用的专一性 —指酶对底物的选择性，也称特异性。 结构专一性 立体异构专一性 绝对专一性 相对专一性 族专一性 键专一性 旋光异构专一性 几何异构专一性 4、酶的专一性 （1）酶的专一性 立体结构专一性 酶仅作用于立体异构体中的一种。 A 锁钥学说——刚性构象 B 诱导契合学说 C 结构性质互补学说 ——静电效应、极性相同 D 三点附着学说 ——立体异构专一性的酶 （2）与酶专一性有关的学说 酶作用专一性的假说 1894、Emil Fischer ：锁钥学说 基于酶对它所作用的底物有严格的选择性而提出．该学说认为：酶和底物结合时，底物的结构必须和酶活性部位的结构非常吻合，就像锁和钥匙一样，这样才能紧密结合形成中间产物． 锁钥学说 诱导契合学说 酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状. （Koshland，1958）：当底物和酶接触时，可诱导酶分子的构象变化，使酶活性中心的各种基团处于和底物互补契合的正确空间位置，有利于催化。 羧肽酶的诱导契合模式 酶的活力测定和分离纯化 1.概念 酶活力就是酶加速其催化的化学反应速度的能力。通过测定酶促反应过程中单位时间内底物的减少量或产物的生成量，即测定酶促反应的速率来获得的。 2.酶活力的表示方法 酶单位：一定条件下，1分钟内能转化1umol底物的酶量为一个酶单位U。 国