铜离子对鞘丝藻生长影响的研究-徐亚鹏.docVIP

铜离子对鞘丝藻生长影响的研究 徐亚鹏 (2012级环境工程2班，学号2012053229) 摘要：本实验研究了低浓度含铜废水对于库式鞘丝藻的生长代谢的影响。实验通过对库式鞘丝藻的培养，测得各时期的藻密度，由此绘制正常情况下库式鞘丝藻的生长曲线得到其生长规律。再通过投加不同量的铜离子在其生长液中，并进行其生长效果的实验以确定最适合鞘丝藻生长的铜离子浓度。在培养藻不同生长周期中，加入一定量的含铜废水，培养观察测定藻细胞数目的变化情况，其细胞增殖最快的培养藻所对应生长周期就可作最佳投加时间。实验研究表明，当铜离子浓度很小的时候，废水含铜离子越多，对鞘丝藻生长影响越大，但当含铜量约为25mg/L时，对其基本没有影响。根据鞘丝藻不同生长周期特点的研究，处于生长对数后期的培养藻虽有相当的活性但是含铜废水对其影响不大。 关键词：库式鞘丝藻；生长周期；含铜废水 水中不同的铜离子浓度对水体质量有着不同的影响。水中Cu2+含量达0.01 mg/L时，对水体自净有明显的抑制作用；超过 3.0 mg/L会产生异味；灌溉水中硫酸铜对水稻危害的临界浓度为 0.6 mg/L。铜对水生生物的毒性很大，有人认为铜对鱼类毒性浓度始于0.002 mg/L但一般认为水体含Cu2+ 0.01 mg/L对鱼类是安全的。 生物治理技术在处理低浓度铜废水方面具有成本低、效益高、易管理、无二次污染、有利于生态环境的改善等优点库氏鞘丝武汉中科院水生生物研究所淡水藻种库培养条件培养基为BG11培养基，pH为7.0，设置对照，温度为25 (C，光照强度为2000 lx，培养14 d (每天定时摇匀，12 h光照与黑暗循环)。 BG11培养基配方 NaNO3 180 mg，K2HPO4·3H2O mg，MgSO4·7H2O .0mg，CaCl2·2H2O mg，Citric acid 0. mg，Ferric ammonium Citrate 0. mg，EDTA 0.1 mg，Na2CO3 2 mg，A5 0.mL，，于121 (C高压蒸汽灭菌。在藻种买回后对藻种进行保种。准备2个100 mL和1个250 mL的锥形瓶并对其进行消毒，把各培养基煮沸消毒灭菌后，将锥形瓶、培养基、量筒、移液枪、瓶塞、酒精灯等一起放入超净工作台中用紫外线照射灭菌30 min,之后在超净工作台上进行接种，接种完后对锥形瓶表面再进行消毒后放入培养箱中进行培养，每天定时摇匀。培养14 d后对三种藻进行扩大培养，培养条件与具体方法同上硝酸钠AR，天津市大茂化学试剂厂、磷酸氢二钾AR，天津市大茂化学试剂厂）、硫酸镁AR，国药集团化学试剂有限公司、无水氯化钙AR，天津市大茂化学试剂厂、磷酸二氢钾AR，天津市大茂化学试剂厂硫酸铜AR，天津市大茂化学试剂厂SW-CJ-1G型单人净化工作台G UV759紫外-可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)、GZ-250-GI智能光照培养箱(韶关市广智科技设备发展有限公司)、AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)、磁力搅拌器。 1.2 测试方法 1)鞘丝藻最大吸收波长确定 取鞘丝藻培养液10 mL，扫描最大吸收波长，最终确定650 nm处为最大吸收峰。 2)藻密度(O.D)的测定 每日定时取样测定，并首先摇匀培养藻液，使细胞分布均匀分散，用20 mL离心管吸取10 mL培养藻液，然后再在紫外可见650 nm的吸光度值。测定其藻密度可以知道藻类的生长变化情况，可以知道藻类在实验过程中生长健康状态。 3)不同的Cu2+ 起始浓度对小球藻的生长的测定 将不同含Cu2+ 起始浓度的溶液倒入藻密度相同的小球藻的锥形瓶中，在小球藻的生长过程中测藻密度，观察Cu2+对小球藻的生长的影响。 1.3 实验过程 1)藻的培养 蛋白核小球藻(编号FACHB-9)：培养基为BG11培养基，pH为7.0左右，设置对照，于25 (C，2000 lx，培养1d(每天定时摇匀12 h左右，昼夜交替)，然后进行实验。650 nm处的光密度值(O.D.650 nm)，并以此作为藻类生长曲线指标。具体为：自接种日开始，每日在相同时间取样测定O.D.650 nm，并以此为纵坐标值，以藻类培养的时间(d)为横坐标，绘出培养藻类的生长曲线。由此可以知道藻类的指数生长期为多少天,从而为之后的实验做准备。 3)不同的Cu2+ 起始浓度对小球藻的生长的测定 在确定生长曲线后，重新开始养藻，待藻长到对数期，也就是藻密度0.3左右时，将藻分装五瓶，每一瓶体积一样，然后分别每瓶加入不同量的铜离子，使藻液中的铜离子浓度为0、10、20、30、40 mg/L。每隔一天测一次藻密度，直到其不在生长。 4)不同生长期投加铜离子对蛋白核小球藻生长效果分析 在确定了最佳Cu2+浓度后，进行不同生长期投加铜离子对蛋白核小球