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- 2017-02-01 发布于天津
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细胞观察
细胞观察 倒置显微镜观察:活细胞观察 普通光学显微镜观察:化学染色标本 如HE染色,免疫组化染色标本等 扫描电镜观察:细胞表面形貌 透射电镜观察:细胞内部超微结构 倒置相差显微镜观察 原理 活细胞无色透明,当光波通过它时,颜色和亮度变化不大。 相差显微镜是利用细胞内结构密度的不同而对光产生折射率有差异的原理,使肉眼不能分辨的相位差变为可分辨的振幅差(即明暗差)。 倒置相差显微镜观察 调节光轴 倒置相差显微镜观察 合轴调节 倒置相差显微镜观察(暗反差) 倒置相差显微镜观察(明反差) 活细胞荧光染色观察 活细胞丫啶橙染色呈绿色 凋亡细胞与溴化乙锭共染呈橙色 扫描电镜观察 透射电镜观察 血球计数板法 制备细胞悬液:细胞密度>104/ml, 细胞过多时需适当稀释,单个细胞率95%。 加样:混悬细胞,取少许细胞悬液,从计数池一侧加入,不要溢出或出现气泡。 计数:10倍物镜下计数四角大方格内的细胞,压线者只计左边线和上边线。 计算:细胞数/ml=(4四大格细胞总数/4)×104×稀释倍数 细胞密度调整 稀释公式:C1·V1=C2·V2 稀释前细胞密度C1,溶液体积V1 稀释后细胞密度C2,溶液体积V2 细胞活力测定-台盼蓝染色法 制备单个细胞悬液:105~106/ml 0.4%台盼蓝染色1 min (9滴细胞悬液+1滴0.4%台盼蓝), 3min 内计数 用血细胞
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