第三章 消毒与灭菌（参考）.ppt

有些噬菌体感染细菌后，并不马上裂解细菌，而是将其基因整合到细菌的基因组中，与细菌的DNA一道复制，并随细菌的分裂而传给后代，此种噬菌体叫温和噬菌体，整合到细菌DNA上的噬菌体基因叫前噬菌体，带有前噬菌体的细菌叫溶原性细菌。温和噬菌体可能会在某个世代自发地从菌体DNA上脱离并复制 ，引起菌体裂解而释放出噬菌体。 温和噬菌体的增殖 噬菌体的应用 由于噬菌体感染具有菌种或菌型的特异性，故可用噬菌体进行细菌的鉴定和分型、检测未知细菌、进行流行病学调查。 此外，噬菌体也是分子生物学及基因工程研究的工具。 第四节 微生物实验室的生物安全 一、生物安全的概念和一般要求 （一）生物安全 是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康可能产生的潜在的有害影响。而兽医微生物实验室的生物安全是指在转移、检查和处理病料、污染材料等过程中，避免污染环境及对人员造成危害。 微生物实验室的生物安全有三层含义 是指防止病原微生物等及其他有害生物或物质传入实验室（防止实验室污染） 是指防止病原微生物等传出实验室（防止散播传染） 是指实验室人员的自身安全防护（防止自身感染） （二）实验室生物安全的一般要求 安全要点主要包括： 1、生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶胶往往最容易污染实验室并造成人员感染。所有送检样本都应视为有传染性并做相应处理。不允许用嘴吸取液体，应采用相应器械 2、涉及有害物质的实验室人员应具备防范生物危害的知识，人员的数量及流动应控制。实验室人员必须穿戴全套防护服，甚至面罩、防护眼镜等。这些用品用后应做灭菌处理。要有良好的卫生习惯，尤其要注意洗手。实验室内不允许吃、喝、涂抹化妆品及装隐形眼镜。实验室工作人员必须接种有关疫苗。 3、对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等必须规定明确的消毒程序，并予实施。推荐使用含氯5.25%的消毒剂或其他消毒剂。 4、最主要的防护并非设施，而是工作人员本身，造成事故的最常见原因主要是由于工作人员缺乏有关知识、训练和粗心大意。 5、只有经培训的人员才能处理动物，操作时动物应予麻醉或镇静，避免伤害人及动物。 6、实验室中处理的微生物提取物，特别是DNA，亦可造成污染，必须注意。 二、兽医微生物实验室 的生物安全分类 目前国际公认的微生物实验室分为生物安全（biosafety level ,BSL）1至4级。 即： BSL-1实验室 俗称 P1实验室 BSL-4实验室 P2实验室 BSL-4实验室 P3实验室 BSL-4实验室 P4实验室 其中BSL-1最低，BSL-4最高。 三、动物病原微生物的分类 （一）世界动物卫生组织的分类 根据病原微生物的传染性、感染人和（或） 动物的危害程度，世界动物卫生组织（OIE） 将动物病原分为1～4类。 即： 1类动物病原 2类动物病原 3类动物病原 4类动物病原 其中1类病原微生物危害最小，4类最大。 （二）我国农业部的分类 我国农业部2005年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依此类推，四类最小。 滤过除菌 是通过机械阻留作用除去液体及气体中的细菌，所用装置叫滤器。滤器上含有很多微细小孔，可使液体及气体通过，细菌等大于孔径的物体不能通过，借以获得无菌液体及气体。 用途 主要用于不耐高温的物体，如血清、毒素、抗毒素、酶、抗生素、维生素、氨基酸及特殊培养基等的除菌。 滤器不能除去病毒、霉形体和L型细菌。 滤器的种类与型号 滤器的种类很多，每种又有许多不同的型号，型号的区别主要是滤膜孔径大小不同。除菌滤器孔径通常为0.2～0.22μm。 实验室常用滤器 耐酸玻璃滤器 蔡氏滤器 微孔滤膜 玻璃耐酸滤器 五、低温抑菌法 低温抑菌的机理 大多数微生物对低温抵抗力很强，在低温条件下微生物的代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持生命。 低温在微生物学工作中的用途 主要用于保存微生物，如： 0～4℃保存细菌 -20℃以下保存病毒 低温保存微生物注意事项 有少数细菌和病毒对低温特别敏感，如淋球菌、巴氏杆菌在4℃保存比室温保存死亡更快，疱疹病毒在-20℃保存比4℃死亡更快。 反复冻融容易引起微生物死亡。 冷冻保存细菌时，温度必须迅速降低，以免菌体内的水分形成结晶冰而损伤细胞膜。 冷冻真空干燥法（冻干法） 保存微生物及生物制品最好的方法 方法： 先将要保存的菌种加上保护剂（如甘油、蔗糖、脱脂乳、血清、二甲基亚枫等），装到安瓿中，在冻干机中迅速冷冻、抽真空、干燥、封口。这样保存的菌种经多年不失去活性。 第二节 化学消毒灭菌法 一、化学消毒剂及防腐剂 消毒剂