高三生物苏教版一轮复习考点规范练：36　基因工程Word版含解析.docVIP

考点规范练36　基因工程 　考点规范练+高考微题组第81页　? 1.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的切割位点。请回答下列问题。 限制酶 BamH HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序 列及切 割位点 图1 图2 (1)图1所示的一个质粒分子经Sma切割前后,分别含有　　　个和　　　个游离的磷酸基团。? (2)若对图中质粒进行改造,插入的Sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越　　　。? (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma切割,原因是? ? 　。? (4)与只使用EcoR相比较,使用BamH和Hind两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止? 　。? (5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入　　　　　　　　酶。? (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。?导学? 答案:(1)0　2 (2)高 (3)Sma会破坏质粒的抗生素抗性基因和外源DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接 (6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 解析:(1)质粒是双链环状DNA分子,在Sma切割前没有游离的磷酸基团,Sma作用于两个核苷酸之间的磷酸二酯键,切割产生的DNA片段末端是平末端,因而质粒经切割后含有2个游离的磷酸基团。 (2)质粒的热稳定性主要由氢键的数量决定,氢键数量越多,质粒的热稳定性越高,反之则越低,DNA分子中A与T之间存在2个氢键,C与G 之间存在3个氢键,因此DNA分子中G—C碱基对越多,热稳定性就越高,Sma识别CCCGGG序列,并在C和G之间将这段序列切开,也就是质粒中Sma 酶切位点越多,G—C碱基对越多,热稳定性越高。 (3)据图1可知,Sma切割的位点在质粒的抗生素抗性基因之中,抗生素抗性基因是标记基因,应尽量避免破坏。据图2可知Sma切割的位点在目的基因之中,如果用Sma切割目的基因,会破坏目的基因。 (4)用同种限制酶切割后的质粒和目的基因,在基因表达载体构建时,常有三种连接方式,其中目的基因与目的基因的连接、质粒与质粒的连接是无效的连接,用两种限制酶可避免此类现象。 (5)基因表达载体的构建过程中需加入DNA连接酶来连接目的基因和切割后的质粒。 (6)抗生素抗性基因属于标记基因,可用来鉴别和筛选含目的基因的细胞。 2.(2015福建宁德期末)P5CS是植物合成脯氨酸的关键酶,脯氨酸有助于植物抵御干旱。下图是将P5CS基因转入烟草细胞获得耐旱烟草植株过程的示意图。 请回答下列问题。 (1)要将P5CS基因成功插入Ti质粒中,Ti质粒的　　　　　　　　　　　中应含有Hind、Sal限制酶切割位点。过程需在农杆菌的培养基中添加　　　　　　　　　　　才能筛选出含P5CS基因的Ti质粒的农杆菌。? (2)检测P5CS基因是否整合到烟草细胞染色体DNA上,采用　　　　　　　　　　　　　　技术,判断转基因是否成功,可以直接在个体水平上对转基因植物与非转基因植物的　　　　　　　　性进行比较。? (3)将转入P5CS基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用　　　　　　　　　　　　　　　技术,愈伤组织通过　　　　　　　　　　　　　　　发育成完整植株,在此过程中,除营养物质外,还必须向培养基中添加　　　　　　　　　　　　　　　　　。? 答案:(1)T-DNA　四环素 (2)DNA分子杂交　抗旱/耐旱 (3)植物组织培养　再分化(细胞增殖和分化)　植物激素(生长素和细胞分裂素) 解析:(1)质粒中的T-DNA又称为可转移的DNA,可以将携带的目的基因转移到受体植物细胞的染色体中去,所以该基因工程要成功,最好将目的基因重组到T-DNA中;因此Ti质粒的T-DNA中应含有Hind、Sal限制酶切割位点。由于重组质粒中含有完整的抗四环素基因,因此过程需在培养农杆菌的培养基中添加四环素才能筛选出含P5CS基因的Ti质粒的农杆菌。(2)检测目的基因(P5CS基因)是否整合到烟草细胞染色体DNA上,应采用DNA分子杂交技术;根据题意,P5CS是植物合成脯氨酸的关键酶,脯氨酸有助于植物抵御干旱,因此转基因是否成功可以直接在个体水平上对转基因植物与非转基因植物的抗旱性进行比较。(3)将转入目的基因(P5CS基因)的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术,愈伤组织通过再分化成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加生长素和细胞分裂素。 3.(2015福建龙岩质检)大豆花叶病毒(RNA病毒)是世界性大豆病害,是造成大豆减产的重要原因。某科研小组制备了大豆花叶病毒的空衣壳蛋白(CP蛋白),生产过程大致如下,请回答问题。 (1