EB病毒潜伏膜蛋白2重重组疫苗的构建及其免疫效果的.docVIP

中国预防医学科学院 博士学位论文 EB病毒潜伏膜蛋白2重重组疫苗的构建及其免 姓名：朱伟严 申请学位级别：博士 专业：免疫学 指导教师：曾毅;周玲 2000.7.1  ? 绻 ? 懦 糏 医 生 Ⅱ ‘ 主 ： ? ? 出 盘 压 墟 ? ? 苅 博士研究生：朱伟严 曾 种人类疾病有关。／在西方发达国家，主要引起青少年的传染性单核细胞增多症， ??，??的病因之～刊 ??状胃腥救颂搴螅?谔迥谛纬汕狈?腥荆?匾煨韵赴??’淋巴细胞 ???????，??在控制处于潜伏感染状态的细胞、防止肿瘤 发生中起着免疫监督作用。正常人体有针对?病毒感染的细胞免疫反应。而仵 ?病毒相关疾病中，?病毒的抗原表达和机体产生的??纯鼍?雔?常人有所 不同。??颊咧刑匾煨陨鄙薚细胞的功能受到抑制，患者外周血中??特异 性细胞免疫功能显著低于一常人群。如果能在?病毒感染阳性者体内持续表达 病毒的细胞免疫水平，这种??从Χ灾琢鼍哂性し篮椭瘟萍壑怠?牛～ ?病毒潜伏膜蛋白???? 人群中较常见。?虼耍琇??晌T谔迥谟盏糆?《咎匾煨訡?、预防和治々，十¨ 关肿瘤的良好靶抗原。临床?τ肔??匾煨缘腃?治疗?病毒相天的淋巴  了它们在诱导特异性细胞毒方面的作用。在肿瘤疫苗的研究当中，??葺猈能 模拟病原体进入机体的自然状态，激发全面而持久的以细胞免疫为主的免疫反 了初步的小鼠免疫试验。结果显示，?病毒的重组核酸疫苗表达质粒可在小鼠 体内诱发针对??蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫。免疫小鼠血清的抗体检 测发现??蛋白诱发体液免疫的能力不强。从? ? ??? ??? 疫接种?芎螅?刈橹柿Ｃ庖叩男∈蟛??攵訪??奶匾煨訡?均高于空载体 免疫小鼠?％一?％以七。在效靶比为?：?保??置庖呒亮康腃?杀伤率为 为了建立在体内外将??导入相关细胞的有效方法，我们还构建了邮俩 毒?獻?重组逆转录病毒。将?病毒??蛋白的基因重组至逆转录病毒载体 通过脂质体将重组质粒导入逆转录病毒的包装细胞系中，通过?? 筛选抗性克隆，培养抗性细胞，收集上清，获得重组病毒。，将之感染小鼠成纤 维细胞????测定病毒滴度为??×???／?，提取转染细胞???蠵?鉴 定，结果证实转染细胞的??泻?心康幕?虻奶匾煨云?巍???? ??的结果也显示我们已获得能产生重组??逆转录病毒的包装细胞系。 重组?琈?逆转录病毒的建立使我们能将??导入相关细胞，研究它在细胞内 的功能，如比较??在淋巴细胞和上皮细胞中的作用等。另外，??能诱导特 异性细胞免疫，可运用重组??逆转录病毒感染细胞作为瘤苗刺激人体产生特 异性细胞免疫反应。皮肤下有丰富的郎罕氏细胞，能捕捉低浓度的外束抗原引 发初次免疫应答。为初步探讨重组??逆转录病毒的应用，我们将重组病毒感 ??坏腄?免疫剂量和重组??一??病毒进行了联合免疫，并观察了?蹵 ．次加强免疫、重组??一??ザ烂庖摺⒅刈長??籑? 强免疫等几种联合免疫模式的免疫效果。《结果发现重复免疫组的免疫效果要优  ? ?詅：各疫莳的应用和免疫方式的研究，将有益于我们进?步探索抗肿瘢粕： 感染???浴?訣?《咎匾煨悦庖叩幕?。?擞肊?相关疫苗能进一步提高机 重组逆转录病毒  ??? ? ? ? ? ? ???? ? ? ? ? ? ? ? ? ??????，?????????????? ??????甌? ????? ? ? ? ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 猘 ? ? ?????瓵?? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? — ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 甋 ? ? ? ???  碰 ? 酝 ? ?X宜?痹裪虫???飅 ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ?????? ??? ?????? ? ? ? ? ? ????．?? ? ? ? ? ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?  ?? ??? ? ? ? ? ? ? — ? ? ? ? ? ? ? ? 甈 ? ? ? ????? ? ? ? ? ?“??? ??? ? ? ? ??? ? ? ??? ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ． ?? ??疨?／? ? ? ? ? ? ? ?