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中国斑马鱼鱼房健康状况 与养殖维护建议 柳力月 中国科学院水生生物研究所 国家斑马鱼资源中心 Email: liuliyue@ 斑马鱼研究发展迅速 From Xie et al., 2015 From Stewart et al., 2014 近年来，中国斑马鱼研究在世界范围内增长速度显著 常见斑马鱼疾病之一 ——微孢子虫病 Low virulence ( 微孢子虫 （Pseudoloma neurophilia） ? 死亡率低 ? 隐性感染一般无特殊外观，病症鱼呈脊柱弯曲体型异常瘦弱等 ? 寄生于斑马鱼脑部、脊髓和卵巢 （Whipps et al.,2000） ? 孢子体可存活于25-50ppm次氯酸钠溶液（Whipps et al.,2000） ? 孢子体亦可存活于液氮中 ? 紫外灯(30K-50K uW SEC/cm2)可以有效去除该病原 ? 严重影响斑马鱼生长速度和繁殖率（Ramsay et al.,2009） ? 影响斑马鱼的群体行为学， 造成在斑马鱼上进行神经系统行为 学等方面实验结果的干扰 (Spagnoli et al.,2016) 常见斑马鱼疾病之二——分支杆菌病 High virulence ( 分支杆菌（Mycobacterium marinum / haemophilum） ? 在美国一较大的斑马鱼鱼房内传播，且后果严重：人员感染接 受长达6个月的抗生素治疗 ? 鱼体内潜伏感染，有些外观正常，无症状，解剖后可见肉芽肿； 卵巢炎症形成溃疡的斑马鱼病兆部位检出过分支杆菌；易导致 斑马产卵率低下 ? 细菌分离培养困难,抗酸性染色 ? 可能致病原因：① 某些菌株的宿主特异性；②某些不良水质下， 鱼体免疫力低下（Kent et al., 2004） ? 50ppm的次氯酸钠可以清除体表分支杆菌；抗生素治疗常选取卡 那霉素(50ppm)、抗结核类药物( Astrofsky et al.,2000；Kent et al., 2004) 中国斑马鱼鱼房内曾发现的鱼病 ( 腹水病 ( 竖鳞病 ? 腹部肿大，内有腹水，游动缓 ? 病鱼游动缓慢，体表粗糙, 鳞 慢，部分失去平衡 片竖起 ? 细菌性疾病，病原通常为革兰 ? 有些伴有腹部肿大积水，可 氏阴性菌 能体表有出血 ? 1-2龄的老鱼较易出现 ? CZRC检出竖鳞病鱼中致病 菌为嗜水气单胞菌 ? CZRC检出腹水病鱼中致病菌 ? 及时隔离，防止传染 为温和气单胞菌、类志贺邻单 胞菌 中国斑马鱼鱼房内曾发现的鱼病 ( 细菌性败血症 ( 下颚组织增生（原因未知） ? 患病的多数是成鱼 ? 鱼下颚出有类鳃状组织增生 ? 病鱼体表、上下颌、眼睛有不 同程度出血点或者皮肤溃烂 ? 不影响鱼的存活率和繁殖率 ? 具有可传染性 ? 由革兰氏阴性菌引起 ? 发病原因未知（水质因素？某病 ? CZRC检出病鱼中致病菌为嗜 原？） 水气单胞菌、温和气单胞菌 ( 鱼房内鱼缸等器具的清洗消毒问题 ? 配种缸、鱼缸等使用后未清洗干净并消毒烘干 ? 挡板及盖板更换不及时，累积污渍 ? 鱼捞未经清洗、浸泡消毒而重复使用 后 80℃消毒前后鱼缸内 表面含菌量检测 鱼房设施系统清洗消毒及维护问题 后 紫外灯更换一年后 及两月后循环过滤 后水体含菌量检测 ( 鱼房养殖系统维护不当 ? 过滤袋未及时清洗、活性炭未及时更换 ? 缺乏对各项水质参数日常监测 ? 未定期校准设备探头，导致pH、温度出现偏差 ? 紫外灯长期未更换导致照度降低 ( 活体饵料丰年虫 ( 饵料孵化缸使用后未消毒清洗 ( 丰年虫培养物未清洗干净，引入病原菌 ( 颗粒性饲料 ( 喂食量过多，饵料沉积，滋生细菌 ( 营养不均衡，繁殖率低 后 后 丰年虫清洗前后稀释10-3含菌 ( 外来引进斑马鱼 胎 ? 无隔离鱼架等隔离措施 ? 引入斑马鱼胚胎未经过消毒处理 ( 鱼房老病死鱼处理 ? 18个月以上的老鱼未及时处死 ? 病鱼、死鱼未及时捞出，导致疾病传播、水质污染 ( 人员操作规范等相关问题 ? 未准备鞋套/拖鞋，易携带病原入内 ? 未带手套进行操作 CZRC现执行的引进鱼隔离操作 ( 引进鱼需放入外部隔离鱼房 ? 隔离鱼房与主鱼房严格分隔开 ( 地域分开 ( 每个系统单独独立循环 ( 鱼缸鱼捞等鱼具分开（从颜色上区分） ? 引进鱼终身不得进入主鱼房 ( 引进鱼后代胚胎经过次氯酸钠消毒后方可放入主鱼房饲养 ( 消毒：0.003%的次氯酸钠浸泡2次，每次5分钟 ( 鱼缸、配种缸、鱼捞等鱼具的清理消毒处理 ( 执行“一缸一捞”操作 ( 鱼捞每使用一次，需要浸泡消毒，80℃烘干 消毒： 0.01%的次氯酸钠浸泡20min以上，清洗烘干 ( 配种缸、鱼缸等，每使用一次后，清洗， 烘干 ( 鱼缸盖板、挡板每