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－１２６－ 食品からの黄色ブドウ球菌検査における発色酵素基質培地の評価 EvalutionofChromogenicMediumsforIsolationStaphylococcusaureusfromFoodSamples 渡邉 節 菅原 直子 小林 妙子 山田 わか 齋藤 紀行 廣重 憲生 SetsuWATANABE，NaokoSUGAWARA，TaekoKOBAYASHI WakaYAMADA，NoriyukiSAITO，NorioHIROSHIGE 黄色ブドウ球菌（Staphylococcusaureus）は食中毒原因菌の一つとして重要な細菌である。食中毒事例では潜伏時 間が短く，食中毒の症状が食品摂取後短時間で発現するため，原因食品の推定あるいは検査検体の入手は容易である が，食品等から黄色ブドウ球菌を定法により分離し同定するのに数日を要することが原因究明の遅れにつながってい る。検査の迅速性，鑑別性を目的に近年販売された発色酵素基質培地X－SA寒天（XSA）培地，クロモアガースタッ フアウレウス（CSA）培地をフォーゲルジョンソン（VJ）培地および従来から用いている卵黄加マンニット食塩 （MSEY）培地とを比較した結果，XSA培地およびCSA培地の発色酵素基質培地は特徴的な色調で他の菌と容易に区 別ができ，迅速性，鑑別性に優れていた。同時に，他属菌の培地発育性，エンテロトキシン型別による発育性，調理 済み食品を用いての検出性および食品添加物の影響について比較検討し，黄色ブドウ球菌検出にはXSAやCSA培地の 発色酵素基質培地が有用であることが確認された。 キーワード :黄色ブドウ球菌；発色酵素基質培地；食品；迅速鑑別 Keywords：Staphylococcusaureus；chromogenicmedium；foodsamples；rapididentification １ はじめに MSEY培地と比較したので報告する。 黄色ブドウ球菌は，ヒトや動物，環境中に広く分布し ているだけではなく，食品の製造?調理環境からも比較 ２ 方法と材料 的高率に分離され，わが国における食中毒起因菌として ２．１ 使用培地と黄色ブドウ球菌の発育性 重要な細菌の一つである。黄色ブドウ球菌による食中毒 MSEY培地（日水製薬）：マンニット食塩寒天培地を は摂食後比較的短時間で吐き気，嘔吐，腹痛および下痢 滅菌後無菌卵黄液（極東製薬工業）を１０％の割に加えた 等を主徴とする特異的な症状を呈するため，推定原因食 培地で，黄色ブドウ球菌はマンニットを分解し黄色集落 品および患者の吐物や便の入手は容易である。反面，検 となり集落周囲は卵黄反応で不透明な光沢輪を形成する。 体からの黄色ブドウ球菌の分離には時間がかかる。これ X－SA培地（日水製薬）：発色酵素基質培地で黄色ブド は黄色ブドウ球菌分離用選択培地としてMSEY培地を用 ウ球菌は約２０時間培養で青色から明るい青色集落を形成 い，その後非選択性の培地を経由して生化学性状試験等 する。 を行っているためである。黄色ブドウ球菌はMSEY培地 CSA培地（CHROM）：発色酵素基質培地で約２０時間 で黄色集落周囲に白濁環の卵黄反応を呈し，その他のコ 培養すると黄色ブドウ球菌は藤色から明るい藤色の集落 アグラーゼ陰性ブドウ球菌等と明確に区別される。しか を形成する。 しMSEY培地は調整時の煩雑さ，陽性菌の判定に経験が VJ培地（OXOID）：フォーゲルジョンソン培地を溶解， 必要なこと，判定までの時間が４８～７２時間かかること， 滅菌後，亜テルル酸カリウムを添加した培地で，黄色ブ 直ちに生化学性状試験に用いることができないなどが問 ドウ球菌は亜テルル酸カリウムを還元して集落周囲にや 題となっている。近年，２０～２４時間で菌分離が可能とさ や黄色を帯びた黒色から黒灰色の集落を形成する。 れるXSA培地，CSA培地およびVJ培地が開発されてい ブレインハートインヒュージョンブイヨン（BHI：日 る。XSA培地とCSA培地はともに発色酵素基質培地で， 水製薬）：黄色ブドウ球菌およびその他の菌の増菌用と 発育集落の色調で他の菌との鑑別が容易である。これら して使用した。 の培地が黄色ブドウ球菌分離の迅速化に寄与できるかを  宮城県保健環境センター年報 第２４号 ２００６ －１２７－ ２．２ 分離培地の発育性比較に使用した菌株 ドウ球菌A２５５株菌液を添加した。また，滅菌PBSにソル 黄色ブドウ球菌（CPSA）として２０株，その他のブド ビン酸（関東化学）０．５，５，５０，５００μg／ml，エリソル ウ 球 菌 と し てStaphylococcusepidermidis３株，コ ア グ ビン