第十二章基因诊断.doc-中南大学网络教学平台.docVIP

中南大学生物科学与技术学院 分子生物学研究中心 教 案 授课科目: 医学分子生物学授课内容: 基因诊断 授课对象：临床医学七年制、八年制 授课时数：4 学时授课教师：授课地点：湘雅医学院新教学区 授课时间： 授课教材：医学分子生物学（21世纪高等院校教材），胡维新主编，北京：科学出版社，2007年2月，第一版； 医学分子生物学（卫生部8年制规划教材），冯作化主编，北京： 人民卫生出版社，2005，第一版 第十二章 基因诊断 一．目的要求 掌握：基因诊断的概念、原理及其特点；常用基因诊断策略、基本技术及其应用。 熟悉：遗传病、肿瘤及感染性疾病的基因诊断策略及方法。 了解：基因诊断的发展；基因诊断临床应用中存在的问题；几种常见遗传病的基因诊断。 二．讲授重点：基因诊断的概念、原理及特点；常用基因诊断策略、基本技术及其应用。 三．讲授难点：基因诊断策略；基因诊断的基本技术及其原理。 四、教学方法：多媒体教学 五、教 具：多媒体课件 六、讲授内容： 传统医学诊断的缺陷：根据病人的临床症状和体征进行诊断，准确性较低；此外，某些疾病（如新型疾病）并无症状可以依据，必需借助于基础医学的实验室诊断技术。 中南大学生物科学与技术学院 分子生物学研究中心 教 案 授课科目: 医学分子生物学授课内容: 在基因水平诊断疾病授课对象：04级临床、口腔医学七年制 授课时数： 4学时授课教师： 朱 敏授课地点：湘雅医学院新教学区T111教室授课时间：2006年5月23日 、5月30日授课教材：医学分子生物学（卫生部8年制及7年制规 划教材），冯作化主编，北京：人民卫生出版社，2005，第一版 第十九章 在基因水平诊断疾病 一．目的要求 掌握：基因诊断的概念、原理及其特点；常用基因诊断策略、基本技术及其应用。 熟悉：遗传病、肿瘤及感染性疾病的基因诊断策略及方法。 了解：基因诊断的发展；基因诊断临床应用中存在的问题；几种常见遗传病的基因诊断。 二．讲授重点：基因诊断的概念、原理及特点；常用基因诊断策略、基本技术及其应用。 三．讲授难点：基因诊断策略；基因诊断的基本技术及其原理。 四、教学方法：多媒体教学 五、教 具：多媒体课件 六、讲授内容（同八年制） 现行的实验室诊断技术主要分为三大类：基于光学显微镜下细胞形态结构的认识，根据疾病所导致细胞形态和（或）数量上的改变提供诊断依据（如镰形红细胞贫血）；检测疾病所致代谢产物和酶的活性变化，是20世纪50年代形成的第二类实验室诊断技术，如肝功能检查；第三类为20世纪60年代开始兴起，以免疫学检验技术为主，通过识别特定蛋白质分子的差异，如恶性肿瘤患者的甲胎蛋白异常表达（AFP）。共同特点都是针对疾病的表型改变建立诊断指标，而表型的改变常常是在疾病的中晚期才出现，在很多情况下也不够特异。 近几十年来医学遗传学和分子生物学的发展，导致对疾病表型和基因型的关系有了较深入的认识：人体所有疾病都直接或间接地与基因有关，可以是人体自身基因由于结构的变异或其他因素导致基因功能或其表达产物异常，也可能是外源性致病基因在人体内表达形成异常表达产物，因而从基因水平认识、诊断疾病成为可能，其理论和技术已开始建立并迅速发展，新型的疾病基因诊断正在形成之中。 基因诊断的概念及常用技术 定义：gene diagnosis，就是利用分子生物学技术，从DNA/RNA水平检测基因的存在、分析基因的结构变异和表达状态，从而对疾病作出诊断。 疾病的基因诊断不仅可以在表型改变以前进行早期诊断，更是对疾病进行本质的诊断，因为它直接以病理基因（致病基因、疾病相关基因和外源性病原生物基因）为分析对象，属于病因学诊断，这是它与传统临床诊断和上述三类实验室诊断的根本区别。 一．基因诊断的方法、原理：目标核苷酸序列的识别及其定性定量分析是基因诊断的基础 基因诊断建立在分子生物学理论和技术发展的基础之上。最早应用于基因诊断的方法为Southern印迹杂交及借助限制性内切酶的片段长度多态性分析。1985年以来，随着PCR技术的建立和发展，一系列建立在PCR基础上的简便、快速、灵敏、可靠的基因诊断技术被广泛应用于多种疾病的诊断。核酸分子杂交和PCR扩增是基因诊断的基础技术，许多基因诊断技术都是以此为基础发展起来的。当然，DNA序列测定和近年来发展起来的基因芯片技术也能用于基因诊断，并有其独特的优点。 核酸分子杂交和PCR扩增及其他常用的基因诊断技术： （一）应用核酸分子杂交可进行基因的特异识别和分析 原理：核酸变性和复性理论。双链DNA分子在某些理化因素作用下解旋，条件恢复后又可依碱基配对规律形成螺旋结构。来源不同、具有互补碱基序列的核酸（D