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酶基本知识酶生产技术酶改性技术应用技术研究进展选择20/20填空24/24简答30/5综合16/2论述10《酶工程》教案汇编1、酶的催化作用特点：具有专一性强；催化效率高和反应条件温和等显著特点。2、酶研究的两个方向：理论研究方向和应用研究方向。理论研究方向：酶的理化性质、催化性质、催化机制等；应用研究：促进了酶工程的形成。3、酶工程定义：利用酶或者微生物细胞、动植物细胞，细胞器，借助于酶的催化作用，通过工程学手段生产产品或提供社会服务的科学体系。4、酶工程的应用范围： 对生物资源中天然酶的开发和生产；自然酶的分离纯化与鉴定技术；酶的固定化技术（酶和细胞）；酶反应器的研制与应用；与其它生物技术领域的交叉与渗透。5、酶工程的组成：酶的发酵生产，酶的分离纯化，酶分子修饰，酶和细胞固定化，酶反应器和酶的应用等方面。6、酶工程的主要任务：通过预先设计，经过人工操作控制而获得大量所需的酶，并通过各种方法使酶发挥其最大的催化功能。酶工程研究简史1878年德国人库尼(Kuhne)首先把这种物质称之为酶(Enzyme)，这个词来自希腊文，其意思是“在酵母中”。1896年德国巴克纳兄弟(Buchner)发现酵母的无细胞抽提液也能将糖发酵成酒精。他们把这种物质称为酒化酶（eymase）。一般认为酶学研究始于1896年。1913年，米彻利斯(Michaelis)和曼吞(Menten)提出中间产物学说，推导出酶促反应的基本方程式——米氏方程。这一学说的提出，对酶反应机理的研究是一个重要突破。Km是酶的特征性动力学参数。物理含义：是指ES复合物消失速度（K2+K3）与形成速度(K1)之比；其数值为酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。V＝Vm/2时[S]＝Km。Km只与酶结构、底物、反应环境有关，与[E]无关。大多数酶Km值在10-2—10-6mol/L范围内。意义：鉴别酶的最适底物；判断在细胞内酶的活性是否受底物抑制；判定酶催化的优势方向及其代谢过程的限速步骤；发现同工酶及其判定抑制作用的类型。1926年，萨姆纳(Sumner)首次从刀豆提取液中分离得到脲酶结晶，证明它具有蛋白质的性质，提出酶的化学本质是蛋白质的观点。但该观点多年以后才被普遍接受。并于1949年得诺贝尔奖。20世纪50-60年代， Koshland提出“诱导契合”理论，以解释酶的催化理论和专一性；Monod提出“变构模型”定量地解释了某些酶的活性可以通过结合小分子（效应物）进行调节，产生了酶的调控技术。1949年，用液体深层培养法进行细菌a-淀粉酶的发酵生产，撂开了近代酶工业的序幕。50年代以后，随着生化工程的发展，大多数酶制剂的生产巳转向微生物液体深层发酵的方法。由于微生物种类繁多，生长繁殖迅速，可在任何季节、任何地理环境下进行生产。这就使酶的生产大规模地发展。1960年，法国的雅各(Jacob)和莫诺德(Monod)提出操纵子学说，阐明了酶生物合成的调节机制。使酶的生物合成可以按照人们的意愿加以调节控制。通过酶的诱导和解除阻遏，可以显著地提高酶的产量。8、酶的分类：1961年国际生化联合会酶学委员会提出将酶分成6大类。即第1类，氧化还原酶；第2类，转移酶；第3类，水解酶；第4类，裂合酶；第5类，异构酶；第6类，合成酶(，或称连接酶)，第7类核酸类酶。9、酶的作用机制：酶的催化机理可能与几种因素有关：酶与底物结合时，两者构象的改变使它们互相楔合，底物分子适当地向酶分子活性中心靠近，并且趋向于酶的催化部位，使活性中心这一局部地区的底物浓度大大增高，并使底物分子发生扭曲，易于断裂。 在另一些情况中，可能还有一些其他的因素使酶反应速度稍有一些增高，如酶与底物形成有一定稳定度的过渡态中间物——共价的ES中间物， 这种ES中间物又可迅速地分解成产物；又如酶活性中心的质子供体和质子受体对底物分子进行了广义的酸碱催化等。10、酶的催化能力：酶仅能改变化学反应的速度，并不能改变化学反应的平衡点。酶本身在反应前后也不发生变化。例如肽键遇水自发地进行水解的反应极为缓慢，当有蛋白酶存在时，这个反应则进行得十分迅速；可降低反应的活化能。在一个化学反应体系中，反应开始时，反应物(S)分子的平均能量水平较低，为“初态”(initialst state)(A)。在反应的任何一瞬间反应物中都有一部分分子具有了比初态更高一些的能量，高出的这一部分能量称为活化能(activation energy)，使这些分子进入“过渡态”(transition state)(即活化态，A*)，这时就能形成或打破一些化学键，形成新的物质——产物(P)。 即S变为P。这些具有较高能量、处于活化态的分子称为活化分子；反应物中这种活化分子愈多，反应速度就愈快。 活化能的定义是在一定温度下一摩尔底物全部进入活化态所需要的自由能(