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食品酶学复习资料
绪论1酶学(Enzymology)是研究酶的性质、酶的反应机理、酶的结构和作用机制、酶的生物学功能及酶的应用的科学 。酶的定义:具有生物催化功能的生物大分子,可以分为蛋白类酶(P酶)和核酸类酶(R酶)两大类别。2什么是酶工程?酶的生产与应用的技术过程食品酶学:酶工程与食品生物技术相结合而形成的一门应用性很强的学科。食品酶学主要内容: 包括酶的基本知识,酶的分离与纯化以及酶在食品工业中的应用等内容。食品酶学主要任务: 讲授酶学基本理论,酶的分离与纯化以及酶在食品加工和保藏中的应用等内容。3米氏方程:表示一个酶促反应的起始速度与底物浓度关系的速度方程。这个方程称为Michaelis-Menten方程,是在假定存在一个稳态反应条件下推导出来的,其中??值称为米氏常数,??是酶被底物饱和时的反应速度,??为底物浓度。当??时,?,Km等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。4酶与底物结合形成中间络合物的理论锁钥假说:认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的,酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样。诱导契合假说:该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状,而只是由于底物的诱导才形成了互补形状.酶生物合成的调节机制——“操纵子学说”5酶的特点:催化效率高、专一性强、反应条件温和、酶的活性是受调节控制绝对专一性: 指一种酶只能催化一种底物进行反应,这种高度的专一性称为绝对专一性。相对专一性: 一种酶能催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反应,这种专一性称为相对专一性。6酶的系统名称由两部分组成:底物+反应类型7酶分为六类:氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂合酶类、异构酶类、合成酶类氧化还原酶(oxidoreductases):催化底物的氧化或还原,而不是基团的加成或者去除,反应时需要电子的供体或受体。转移酶(Transferase)催化功能团从一个底物向另一个转移。水解酶(Hydrolase)催化底物的水解反应。裂合酶(Lyase)能催化底物分子开裂成两部分,其中之一含有双键。这类酶催化反应都是可逆的。开裂点可以是碳碳、碳氧或碳氮键。异构酶(Isomerase)催化底物的分子内重排反应,特别是构型的改变和分子内的氧化还原。合成酶(Ligase)能将两个底物连接成一个分子,在反应时由ATP或其他高能的核苷三磷酸供给反应所需的能量。8酶活力定义:是指酶催化反应的能力,它表示样品中酶的含量。酶活力通常以在最适条件下酶所催化的化学反应的速度来确定。酶活力单位:用来表示酶活力的高低。在标准条件下(指温度25℃,以及最适底物浓度、最适缓冲液离子强度和pH)1min内催化1μmol底物转化为产物的酶量为该酶的一个活力单位。这个单位称为酶的国际单位(IU, international unit )酶的总活力:样品的全部酶活力。 。总活力= 比活力 × 总体积(ml)或 = 比活力×总质量(g)比活力: 指每毫克蛋白质所含酶活力的单位数(单位/毫克蛋白)。比活力是酶纯度指标,比活力愈高表示酶愈纯。酶的发酵生产固体培养发酵:培养基以麸皮、米糠等为主要原料,加入其他必要的营养成分,制成固体或半固体的麸曲,经灭菌、冷却后,接入产酶菌株,在一定条件下进行发酵。1固定化细胞:(又称固定化活细胞或固定化增殖细胞。) 指采用各种方法将细胞固定在水不溶性的载体上,在一定的空间范围内进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。固定化细胞发酵具有显著的优点:(1) 提高产酶能力:固定化细胞的密度较高,反应器水平的生产强度较大,可提高生产能力;(2) 稳定性好,可以反复使用:发酵稳定性好,可以连续使用较长的时间,易于连续化、自动化生产;(3) 提高设备利用率:细胞固定在载体上,流失较少,可在高稀释率的情况下连续发酵,大大提高设备利用率;(4) 产品易分离纯化:发酵液中含菌体较少,利于产品分离纯化,提高产品质量等。固定化细胞发酵的缺点:历史不长;技术要求较高(需要特殊的固定化细胞反应器);只适用于胞外酶的生产,还存在不少问题待解决。固定化方法:吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法、热处理法等。特点:1.提高产酶率; 2.可以反复使用或连续使用较长时间; 3.基因工程菌质粒稳定,不易丢失;4 . 发酵稳定性好;5.缩短发酵周期,提高设备利用率;6.产品容易分离纯化;7.适用于胞外酶等胞外产物的生产2发酵产酶的细胞必需具备的条件:(1)酶的产量高。高产细胞可以通过筛选、诱变、或采用基因工程、细胞工程等技术而获得。(2)容易培养和管理。要求产酶细胞容易生长繁殖,并且适应性较强,易于控制,便于管理。(3)产量稳定性好。能够稳定用于生产,不易退化。 (4)利于酶的分离纯化。产酶细胞及杂质易于和酶分离。(5)安全可靠,无毒性。细胞及代谢物安全无毒,不会影响生产人员和环境,也
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