【课堂新坐标】2014版高三生物二轮复习 第1部分 专题8 第1讲 基因工程和细胞工程课件 新人教版.pptVIP

据图回答下列问题： (1)过程①所需的酶是____________________ 。 (2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是______________________。原生质体经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 ________植株的根尖，通过________、________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 【解析】　熟记植物体细胞杂交过程，准确解读信息是解题关键。 (1)获取植物细胞的原生质体可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞。(2)根据题干信息可知，供体使用的是叶肉细胞的原生质体，所以可将融合的细胞是否含叶绿体作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体因没有了细胞壁，在低渗溶液中容易吸水涨破，加入甘露醇可保持一定的渗透压，以保持原生质体的完整性。原生质体需再生出细胞壁形成杂种细胞，然后经分裂、脱分化形成愈伤组织。 (4)若要分析再生植株的染色体变异类型，需对再生植株细胞和双亲细胞的染色体形态与数目进行比较。植物细胞有丝分裂装片的制作包括解离、漂洗、染色和制片四个步骤。(5)由图可知，植株1、2、4的条带中除了具有花椰菜的DNA片段外，还有来自黑芥的DNA片段，所以是杂种植株。(6)对杂种植株进行病原体(黑腐病菌)接种实验，若不患黑腐病，即为高抗性杂种植株。 【答案】　　(1)纤维素酶和果胶酶　 (2)叶绿体　 (3)保持原生质体完整性　细胞壁　(4)双亲(或花椰菜和黑芥) 　解离　漂洗　(5)1、2、4　(6)黑腐病菌 1．(2013·江苏高考T22－B)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。(√) 2．(2013·大纲全国卷T2－B)动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶。(×) 【提示】　植物组织培养不需要用胰蛋白酶。 3．(2013·重庆高考T5－C)愈伤组织培养后的出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控。(√) 4．(2012·广东高考T2－B)培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。(×) 【提示】　主要技术应为组织培养。 5．(2011·江苏高考T14－B)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。(×) 【提示】　体细胞杂交技术，目前仅指用于植物体细胞杂交，由此获得杂交植株。 6．(2011·四川高考T5－D)应用DNA探针技术可以检测到转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达。(×) 【提示】　DNA探针杂交技术只能检测到目的基因的存在，而不能检测其是否翻译出蛋白质。 (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由____________连接。 (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是________末端，其产物长度为_____________。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA片段。 (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是_________________。 【研析】　本题主要考查转基因技术中的操作工具与目的基因的筛选及DNA的复制等知识，旨在考查考生的提取信息能力、识图能力和分析推理能力。解题过程如下： 审 题 信息1：“目的基因D中的一条脱氧核苷酸链中相邻的两碱基”的连接——得出通过“脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖”连接 信息2：由题干一个关键词“bp即碱基对”及SmaⅠ的切割位点——得出切割产物为三部分，796bp的长度向左向右分别减小了3个bp 信息3：由“目的基因D中C—G被T—A替换”——推出SmaⅠ无法再对突变后形成的d基因中突变碱基序列进行切割，即d基因只能被切割为两部分(1327bp和661 bp) 信息4：图2标记基因A(抗生素A抗性基因)、B(抗生素B抗性基因)的碱基序列分别为GGATCC、GATC——推测只有BamHⅠ切割才能保留其中的一个标记基因和目的基因不受破坏 破 题 思考1：基因的平面结构中单、双链中相邻碱基间的不同连接方式 思考2：限制酶在基因工程操作中的作用特点 思考3：表达载体构建时必须注意的问题 思考4：基因工程操作的基本流程 答 题