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胰岛素抵抗论文:凋亡因子在胰岛素抵抗及其干预组大鼠靶组织中的表达研究
胰岛素抵抗论文:凋亡因子在胰岛素抵抗及其干预组大鼠靶组织中的表达研究
【中文摘要】通过出生当日Wistar大鼠注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立胰岛素抵抗(IR)模型,观察该模型32周龄时的凋亡因子在各组织中的表达情况。采用不同药物干预治疗,探讨凋亡因子表达对胰岛素抵抗及其干预组各组织中的表达情况,以探讨其表达与胰岛素抵抗程度的关系。方法:1.实验动物及分组:出生当日Wistar大鼠,通过腹腔注射STZ (90mg/kg)复制IR模型。常规伺养至8周龄,符合糖耐量试验餐后2小时血糖≥11.1mmol/L或空腹血糖≥7. Ommol/L条件者选入本研究。设立正常对照组(NC组)、胰岛素抵抗对照组(IR组)、二甲双胍(MET组)及川芎嗪+氨基胍(TMP+AG组)治疗组。2.空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)检测:分别于造模第8周和32周断尾取空腹血,检测FPG,留取血清检测FINS,根据公式(FPG·FINS)/22.5计算胰岛素抵抗指数(IRI)。3.病理学检测:肾组织学切片行苏木素-伊红(HE)染色,观察肾组织形态学变化。4.免疫组织化学染色:观察肾、肝、脑组织凋亡因子Caspase-3蛋白、Fas蛋白表达。5.免疫印记实验(western blot, WB)观察肾、肝、脑组织中凋亡因子Caspase-3蛋白、Fas蛋白表达。6.反转录RT-PCR:分别检测肾、肝、脑组织Caspase-3、Fas-L和P53的mRNA的表达水平。结果:1.FPG和FINS检测结果:8周龄时,模型组的FPG、FINS和IRI含量均高于NC组(P0.05),TMP+AG组表达降低(P0.05)。5.反转录RT-PCR结果:caspase-3mRNA在肝、脑、肾中表达趋势与免疫组化结果基本一致,Fas-LmRNA在肝、脑、肾组织中均有表达,其中在肝脏组织表达最为丰富,情况如下:NC组中表达相对较少,IR组、MET组和TMP+AG组中表达较NC组均明显增多(P0.05),MET组和TMP+AG组均较IR组明显减少(P0.01),且TMP+AG组比MET组减少更显著(P0.05)。P53mRNA在肝、脑、肾组织中均有表达,但是脑组织中表达较少,与caspase-3mRNA、Fas-LmRNA表达趋势基本一致。结论:1.STZ可以诱导出生当日Wistar大鼠产生IR。该模型FPG、FINS、IRI明显高于正常对照大鼠。该模型多种组织中不同凋亡因子表达有明显改变,提示胰岛素抵抗程度的变化与不同凋亡因子表达改变的参与有关。2. MET、TMP+AG组通过二甲双胍、川芎嗪+氨基胍药物的干预,可明显降低胰岛素抵抗程度,同时也下调caspase-3、FAS蛋白,进一步佐证该胰岛素抵抗的程度的确与凋亡因子caspase-3、FAS参与有关。MET、TMP+AG组胰岛素抵抗程度与凋亡因子的改变程度不同,以TMP+AG组改变更加明显,提示川芎嗪+氨基胍干预过程凋亡因子的影响更大。其确切机制尚待进一步探讨。3.结果显示,胰岛素抵抗大鼠多种器官组织caspase-3、FAS-L和P53的转录及翻译水平均明显上调,应用二甲双胍、川芎嗪加氨基胍药物干预可下调其表达,并伴随不同程度的胰岛素抵抗缓解。提示胰岛素抵抗的形成及程度与促凋亡因子表达正相关。
【英文摘要】:In order to observe the expression of apoptosis factor in different tissuewhen wistar rats were thirty-second weeks, neonatal wistar rats were induced by a single intraperitoneal injection of streptozotocin(STZ) to establish an animal model of insulin resistant; using different methods to treat the rats and observe the concentration of apoptosis factor in insulin resistance and treating groups, investigating the relationship of insulin resistance and apoptosis factors.Methods:1. Animal models and group divisionsThe insulin resistant model of neonatal Wistar rats was conducted by a single intraperitoneal inje
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