颅脑损伤动物实验方案.docVIP

XX药物大鼠脑损伤的实验研究方案 1 目的：考察XX药物对大鼠脑损伤后运动及感觉功能恢复。 2 方法： 动物分组 将60只wistar大鼠按体重编号随机分为6 组, 每组10只。 ① 假手术组: 仅施行开颅手术, 不给予损伤。 ② 单纯损伤组: 损伤后，每日静脉给予生理盐水（与高剂量组等体积）。 ③ 阳性对照组：损伤后，每日静脉给予神经节苷酯10mg/kg。 ④ 低剂量观察组：XX药物/kg (转换因子法，相当于60kg体重的人/天) ⑤ 中剂量观察组：XX药物/kg (转换因子法，相当于60kg体重的人/天) ⑥ 高剂量观察组：XX药物/kg(转换因子法，相当于60kg体重的人天) 造模 运动区机械性脑损伤模型的建立: wistar 大鼠腹腔注射10 % 水合氯醛(0.4ml/100g) 麻醉, 固定于立体定位仪上,参考大鼠鼠脑图谱,大鼠脑右侧运动感觉区皮质大体定位区域为:以前卤右旁2.5mm, 后1mm为原点, 前后各2.5mm,左右各1mm的一狭长区域。制作大鼠脑损伤模型时, 在消毒后于头部正中线作一纵形头皮切口, 钻孔并暴露上述区域, 于创伤点用1ml注射针头破坏上述运动感觉区皮质, 针头刺入皮质约2mm深, 取出针头。无菌骨蜡填充骨窗缺损处。缝合切口, 雌雄分笼, 置于笼内自然苏醒、自由饮食。 给药方法 给药途径采取静脉推注给药的方法，于损伤后12小时开始第一次推注给药，以后每日静脉推注给药一次，连续给药20天。 神经运动行为学评分及行为学检测: 术毕2 4 h采用运动及感觉神经功能评分法： (l) 运动试验: 提尾试验, 每项计1 分: 前肢屈曲,1 分; 后肢屈曲,1 分;头与垂直轴成角大于10 度并持续30 ,1 分。 (2) 行走试验, 最高3 分: 正常行走, 0 分; 向前直行时不稳,1分; 向瘫痪侧转圈者,2 分; 身体向偏瘫侧倾倒, 3 分。 (3) 感觉试验, 每项记1 分: 放置试验(视觉和触觉试验)l 分; 本体感觉(深感觉, 将鼠爪压向桌面刺激肢体肌肉反应),l 分, 最高分8 分。损伤后10 d 和20 d再次对各组进行评分。 血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量变化 TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8(±S) 组别 术术毕2 4 h术毕术毕假手术组单纯损伤组阳性对照组低剂量观察组剂量观察组剂量观察组血清TNF-α含量变化(S) 组别 术术毕h 术毕2 4 h术毕 h 术毕假手术组单纯损伤组阳性对照组低剂量观察组剂量观察组剂量观察组血清IL-1含量变化(S) 组别 术术毕h 术毕2 4 h术毕 h 术毕假手术组单纯损伤组阳性对照组低剂量观察组剂量观察组剂量观察组血清IL-6含量变化(S) 组别 术术毕h 术毕2 4 h术毕 h 术毕假手术组单纯损伤组阳性对照组低剂量观察组剂量观察组剂量观察组血清IL-8含量变化(S) 组别 术术毕h 术毕2 4 h术毕 h 术毕假手术组单纯损伤组阳性对照组低剂量观察组剂量观察组剂量观察组(±S)来表示，血清中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8(±S)来表示。统计学方法采用SPSS10.0 统计学软件进行处理,组间比较采用方差分析, 对组间方差不齐的采用非参数Kruskal-Wallis 秩和检验, 同一指标不同时间的数据比较采用重复测量的方差分析, 进一步的多重比较采用LSD 法。