关于植物组织培养的研究结题报告.docx

关于植物组织培养的研究执信中学2015级高二（3 ）班指导老师：林挺学生：李维坤、冯悦、方家媛、丁豫楠、区楚岚、谭铭霞摘要：通过本次试验，我们掌握无菌操作的植物组织培养方法；通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；通过诱导非洲菊根、茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法；了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。关键词：植物组织培养、消毒方法、植物细胞的全能性研究背景：现代生物科学技术创新实验，指的是有别于中学生物教学传统实验的生物学实验。中学生物教学的传统实验依托于传统生物学，主要引导学生通过观察、解剖了解动植物的基本结构，通过光学显微镜的使用观察细胞的基本结构及重要生命活动，通过简单的生化实验了解构成生命的物质及酶的相关作用，通过田野调查体验生态学实验的一般方法，等等。现代生物科学技术创新实验的开展，一方面，对于增长高中学生的生物学见识，提高生物学学习热情，为今后进一步理性选择生物学学习和研究之路打下基础；另一方面，所选的实验内容贴近高中生物课本选修一及选修三的内容，对于学生更直观地形成对课本内容的感性认识，进而理解课程内容有重要作用，同时也为教师教学积累了更丰富的实验经验和图片素材。研究目标：通过这轮实验，可以使我们更全面的理解灭菌和消毒的区别，以及各种灭菌、消毒方式的适用范围，以及通过实验后的观察，使我们对植物细胞生长的条件和速度有直观的认识。研究方法：研究原理（一）植物组织培养 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。 （二）植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。 （三）组织的分化与器官建成 外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。 （四）培养基的组成 培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。试验用品及试剂配液所用器材和MS培养基成分（表1）仪器设备：电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml）量筒（1000ml、100ml、25ml） ， 容量瓶(1000ml、500ml、100ml)，移液管（10ml，5ml，1ml）试剂瓶，玻璃棒数支，药匙，称量纸等外植体的处理试剂： 洗衣粉、无菌、70%酒精、0.1-1%升汞5-8 min（也使用了过氧化氢溶液）步骤： 第一步：清理材料→→流水冲洗→→加入吐温（或洗衣粉）清洗 →→自来水冲洗； 第二步：对材料的表面浸润灭菌 ： 70%酒精浸10-30秒→→无菌水； 第三步：灭菌剂处理→→ 0.1-1%升汞5-8 min（或其他灭菌剂） ； 第四步：无菌水进行冲洗。3、具体实验流程（表1）表1 微生物培养与植物组织培养实验流程日程（总耗时3周）单次实验耗时参与学生人数实验或准备内容第一周周三下午放学1 h8组培瓶的清洗和灭菌第一周周四下午放学1 h4MS培养基的配制和灭菌第一周周六上午课前0.5 h4外植体材料的初步清洗和切割第一周周六正式实验1.5 h501、研学小组各派一人在超净工作台负责外植体消毒2、完成后，学生按顺序轮流进超净工作台接种外植体第二、三周大课间5~10 min50观察自己的实验成果，拍照附：由于第一次试验结果并不理想，因此我们进行了两次试验，并在第二次试验中添加了植物激素。图1 植物组织培养实验过程研究结果：植物组织培养最终几乎都以发霉结局，究其原因主要有两个方面：一是班级规模的操作流程不可避免地带来了很多不确定的污染因素，这与植物组织培养对无菌要求极为严格的条件是相冲突的；二是外植体的选择和植物激素的使用尚需要进一步摸索；三是人为偶然事件，在培养的过程中，无关人员无意将电闸关闭，导致培养环境中的温度光照都出现了变化，大大影响了实验的质量。但是植物组织培养过程仍能让学生体会到科学实验的不易和无菌操作的重要性，收到预期效果。虽然结果不够理想，但是仍然给了我们很好的体验和实践的机会。感想和收获：高二（3）班 区楚岚如果说前两次的研学收获