蛋白质双向电泳测试服务用户须知.docVIP

蛋白质双向电泳测试服务用户须知 本测试中心双向电泳可提供服务内容： 第一向等电聚焦：可分别提供7cm和17cm两种规格固相胶条，pH范围为3-10、4-7，若用户需其他规格胶条需自行购买 第二向SDS：可分别提供（宽×高×厚cm）为7×6×0.075或20×20×0.1的聚丙烯酰胺凝胶 染色方式：可分别提供考马斯亮蓝R-250、银染、银蓝（考马斯亮蓝G-250） 软件分析：采用PDQuest软件分析，提供蛋白点比对及差异表达数据 凝胶上蛋白点回收 二、收费标准： 项目 校内/校外(元) 双向电泳测试费 500/1000/样品 IPG胶条 7cm 120/根 17cm 150/根 相关试剂及耗材 100/样品 注：胶条及耗材均按成本价收费 三、服务要求： 用户详细阅读本中心网站（）开放服务相关内容了解测试用户须知、设备性能指标。 用户需至少提前3周到设备开放中心负责人处登记、预约； 用户预约时需提供详细完整的实验设计方案并填写蛋白质双向电泳样品登记表（附件I）； 用户与测试中心确定测试方案后签订合同，缴纳50%合同预付款后进行测试服务； 用户可自行提供实验中所用的胶条和相关试剂，本测试中心只收取测试费用。 四、测试样品要求： 所有待分析的蛋白样品需全部处于溶解状态，必要时请加入相应浓度的蛋白酶抑制剂，本中心不负责蛋白提取。 样品含盐量应控制在20mM以内，防止样品在聚焦时发生蛋白的聚集和沉淀。 样品浓度须已经过测定，考染需求蛋白量不少于1mg，银染需求蛋白量不少于200μg。（本中心可提供蛋白浓度测定服务，25（校内）/50（校外）元/样品）。 需预先去除样品中的核酸(样品中加入0.1倍体积的含有1mg/ml DNase、0.25mg/ml RNase A的溶液和50mmol/L MgCl2溶液在冰上孵育)。 需预先去除样品中的杂质及脂类物质（推荐使用三氯醋酸丙酮沉淀蛋白步骤提纯）。 需预先去除样品中起干扰作用的高丰度或无关蛋白，以保证待研究蛋白的可检测性（根据具体的样品蛋白成分采用相应的方法去处高丰度蛋白，如透析、亲和层析、液相分离、萃取、离心等方法，或采用蛋白分步提取技术）。 建议将蛋白样品用试剂盒纯化后再进行双向电泳，（推荐纯化试剂盒：GE 2-D Clean Up Kit 或Bio-Rad的ReadyPrep 2-D cleaner Kti） 如样品或其类似物曾在本室做过或有文献报道，须提供有关信息。 如样品有毒性或腐蚀性，须事先声明。否则造成的一切不良后果用户自负。 附件I 蛋白质双向电泳样品登记表 （请各位老师和同学根据对外服务内容建立登记表） 蛋白样品来源 种属： 组织： 样品名称、数量及编号 样品蛋白浓度（mg/ml） 第一向胶条长度(请选择) 7cm 17cm 第一向胶条pH范围 （若有多种规格，请详细列出） 第二向SDS胶浓度 染色方法（请选择） 考染R250 银染 银蓝G250 凝胶成像方式（请选择） 凝胶成像仪扫描（UVP) 荧光扫描（Typhoon) 是否需要胶上蛋白回收 是 否