调查马钱子生物碱微囊的制备及评价　.docVIP

调查马钱子生物碱微囊的制备及评价　 　　马钱子，亦名番木鳖，是马钱科植物马钱的干燥成熟种子，广泛分布于南亚地区，具有缓解风湿疼痛、改善血液循环、治疗癌症等作用。马钱子中的主要有效成分为总生物碱，其质量分数为1.5%～5%，其中马钱子碱和士的宁是马钱子总生物碱中最主要的两个成分，分别占总生物碱质量的30%～40%和45%。这两种生物碱皆为有毒成分，用药不当便会引发中毒乃至危及生命。本课题组前期研究表明不同粒度的马钱子粉末中两种生物碱的体外释放累积释放率10min内就达到50%～80%，在80min时基本不再释放。因此，需要采用适当的制剂技术将马钱子生物碱进行包和，以延长其体外释放时间，降低其毒性，从而达到安全用药的目的。微囊化是一种新型制剂技术，其使用具有生物降解作用的天然或者合成的高分子材料，将药物包裹在微小的近似球状的体系中形成微囊。经过微囊化后的药物又可以制备成各种剂型，如注射剂、散剂、植入剂、胶囊剂、颗粒剂等，方便临床用药。有文献报道以马钱子粉为囊芯制备马钱子微囊，测定其在蒸馏水中的累积释放率，结果出现暴释现象。而本实验以马钱子生物碱为囊芯，采用乳化-溶剂扩散法制备微囊，并以人工胃液为溶出介质考察其体外释放性能，更具体内外相关性。另外，与传统的环糊精包合工艺相比，乳化-溶剂扩散法制备微囊时具有载药量高的优势。 　　1　材料与仪器 　　1.1　材料 　　自制马钱子生物碱(马钱子碱和士的宁的质量分数分别为32.77%和54.29%);乙基纤维素、吐温-80(化学纯)、胃蛋白酶(生化试剂)，均购自国药集团化学试剂有限公司;乙酸乙酯、盐酸、三氯甲烷、磷酸二氢钾、氢氧化钠，均为国产分析纯;马钱子碱对照品、士的宁对照品(批号分别为110706-200505、110705-200306，中国药品生物制品检定所);乙腈、甲醇(色谱纯，德国默克有限公司);庚烷磺酸钠(色谱纯，东京化成工业株式会社)。 　　1.2　仪器 　　DZF-6000型自动蒸汽产生器(上海贝龙机械有限公司);DZF-6050型真空干燥箱(上海一恒科技有限公司);SHB-3型循环水真空泵(上海申生科技有限公司);S23-2恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器有限公司);ML104/02电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司);S-3400N真空扫描电子显微镜(日本日立公司);Mastersizer　2000激光粒度仪(英国马尔文仪器有限公司);ZRS-8G智能溶出度试验仪(天津天大天发科技有限公司);岛津20AD-RX高效液相色谱仪(日本岛津公司)。 　　2　方法与结果 　　2.1　微囊的制备及工艺优化 　　2.1.1　微囊的制备方法　采用乳化-溶剂扩散法制备马钱子生物碱微囊。先在烧杯中将一定量的囊材乙基纤维素溶于有机溶剂乙酸乙酯中，再加入马钱子生物碱，超声并搅拌使其溶解，即得有机相。再在另一烧杯中配制被乙酸乙酯饱和的去离子水，加入适量乳化剂吐温-80，在转速400r/min下搅拌，即为水相。将有机相以滴状缓慢地加入到水相中，并在该转速下搅拌30min至形成均匀小液滴。滴入过量的去离子水，沉降，抽滤，干燥即得微囊。 　　2.1.2　微囊中马钱子生物碱载药量及包封率的测定　以微囊中马钱子总生物碱(即马钱子碱与士的宁)的包封率(EE)和载药量(DL)来评价制备得到的微囊，同时综合考虑微囊的形态，来优化马钱子生物碱微囊的工艺条件。　EE=微囊中马钱子总生物碱的质量投入的马钱子总生物碱的质量times;100%　DL=微囊中马钱子总生物碱的质量微囊质量times;100%综合评价(CI)=载药量times;50%+包封率times;50% 　　2.1.3　微囊制备工艺的优化　前期预实验的结果，选取囊材(乙基纤维素)质量浓度(A)、囊芯(马钱子总生物碱)与囊材的质量比(B)、乳化剂体积分数(C)、有机相与水相的体积比(D)4个因素进行L9(34)正交设计试验(见表1)，以微囊的载药量、包封率及综合评价为指标优化制备工艺，试验结果及方差分析。A、B因素对微囊包封率、载药量及综合评分的影响较大。以包封率和综合评分为角度分析时，微囊制备的最佳条件为A3B3C2D2，以载药量为角度分析时最佳制备条件为A3B1C1D1。然而，选择A3B3C2D2时制备的微囊成球但含有较多丝状和絮状物，可能是囊材用量过多使得有机相过于黏稠所致;选择A3B1C1D1时制备的微囊呈白色球形，粒径均匀、适中，流动性较好。由此，确定最佳工艺条件为A3B1C1D1，即囊材乙基纤维素质量浓度为0.135g/mL，囊芯(马钱子生物碱)与囊材质量比为1∶20，乳化剂(吐温-80)体积分数为2%，有机相(乙酸乙酯)与水相体积比为1∶5。