谈姜石肠炎康颗粒醇沉工艺的星点设计- 效应面法优化.docVIP

谈姜石肠炎康颗粒醇沉工艺的星点设计- 效应面法优化 　　姜石肠炎康颗粒是我院医院制剂( 甘药制字 ，由白头翁、秦皮、黄柏和姜石等8 味中药组成，具有清热解毒、燥湿涩肠、凉血止痢的功效，用于治疗腹痛泄泻，食欲不振，腹胀等症，疗效显著。为矿物药加部分药材粉碎成细粉与水提液所浓缩成的浸膏采用湿法制粒技术制成的混悬型颗粒，由于此技术所生产的颗粒不但服用量大，而且颗粒溶解后容易产生沉淀，需摇匀服用，患者不宜接受等缺陷，所以有必要对本制剂生产过程中的提取、精制纯化工艺进行研究。 　　星点设计- 效应面法所建立的模型为非线性数学模型，因其复合相关系数高，预测性好，结果直观，而被广泛地应用于药剂开发研究，中药炮制、提取、制粒等工艺参数的优化。目前，醇沉工艺多采用正交设计和均匀设计等方法，而采用星点设计- 效应面法优化中药处方醇沉工艺研究较少。因此，本实验采用星点设计- 效应面法对该制剂的醇沉工艺参数进行优化，为姜石肠炎康颗粒的精制纯化工艺研究提供依据。旨在减少患者服用量的同时，提高制剂的内在品质。 　　1 仪器与材料 　　1. 1 仪器高效液相色谱仪( 美国Waters 公司) ; AR124CM 电子天平0. 1 mg( 奥豪斯仪器上海有限公司) ; AR124CM 电子天平0. 01 mg( 奥豪斯仪器上海有限公司) ; 比重计( 江苏盛创自动化仪表有限公司) ; RE - 3000 型旋转蒸发器( 上海亚荣生化仪厂) ;GTR10 - 2 型离心机( 北京时代北利离心机有限公司) ; ZXFD -A5140 全自动新型鼓风干燥箱( 上海智城分析仪器制造有限公司) 。 　　1. 2 试药盐酸小檗碱对照品( 中国食品药品检定研究院，批号: 110713 - 201212) ; 秦皮甲素对照品( 中国食品药品检定研究院，批号: 110740 - 200104) ; 乙腈( 色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司) ; 甲醇和无水乙醇( 分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司) ; 其他试剂均为分析纯; 水为超纯水。 　　2 方法与结果 　　2. 1 实验方法依处方比例称取药材，按提取条件进行提取，过滤，合并滤液，按星点效应面实验安排表中试验点进行醇沉处理，抽取上清液，将上清液浓缩至浓度为2. 5 g 生药/ml 的清膏，备用。以盐酸小檗碱( Berberine hydrochloride，BH) 、秦皮甲素( Aesculin，AE) 和出膏率( Paste - forming rate，PFR) 为评价指标优选醇沉工艺。 　　2. 2 出膏率的测定精密量取醇沉后的上清液50 ml，置于已干燥恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置于105 ℃的干燥箱内干燥3 h，取出放入干燥其中自然冷却30 min，迅速精密秤定重量，按照下列公式计算出膏率。出膏率( %) = 干浸膏重量/药材重量times; 100%。 　　2. 3 含量测定 　　2. 3. 1 供试品溶液的制备精取“2. 1”项下样品液1 ml，置蒸发皿中，水浴( 60 ℃) 蒸干，用甲醇溶解，并定容至25 ml，用0. 45mu;m 微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。 　　2. 3. 2 对照品溶液的制备 　　2. 3. 2. 1 盐酸小檗碱对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品2. 52 mg，置25 ml 量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2. 3. 2. 2 秦皮甲素对照品溶液的制备精密称取秦皮甲素对照品10. 00 mg，置10 ml 量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2. 3. 3 阴性样品的制备按处方比例，分别取不含黄柏和秦皮药材两副处方药，按提取条件进行提取，过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1. 10，加无水乙醇调至乙醇体积分数为60%，静置24h，抽取上清液，将上清液浓缩至浓度为2. 5 g 生药/ml 的清膏。分别取两种阴性样品液各1 ml，置蒸发皿中，水浴( 60 ℃) 蒸干，分别用甲醇溶解，并定容至25 ml，用0. 45 mu;m 微孔滤膜过滤，即得黄柏阴性样品溶液和秦皮阴性样品溶液。 　　2. 3. 4 样品中盐酸小檗碱和秦皮甲素含量的测定 　　2. 3. 4. 1 色谱条件色谱柱: Symmetry Shield，RP18( 4. 6 times; 250mm，5 mu;m) ; 流动相: 乙腈- 0. 1% 磷酸水溶液( 25∶ 75; 每500 ml含0. 25 ml 三乙胺) ; 检测波长: 265 nm; 进样量: 20 mu;l。流速: 1ml /min; 柱温: 室温。 　　2. 3. 4. 2 精密度试验分别取同一盐酸小檗碱对照品溶液( 10