生物化学7 酶课件.pptVIP

酶学研究简史 公元前两千多年，我国已有酿酒记载。 一百余年前，Pasteur认为发酵是酵母细胞生命活动的结果。 1877年，Kuhne首次提出Enzyme一词。 1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母提取液，实现了发酵。 1926年，Sumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。 1982年，Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。 1995年，Jack W.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性的DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。 二、[E]对V的影响 当[S]＞＞[E]，酶可被底物饱和的情况下，V与[E]成正比。 关系式：V = K3 [E] 二、 酶含量的调节 酶蛋白合成的调节 酶降解的调节 酶的分类编号 四个用点“●”分开的数字前冠以EC（酶学委员会） （三）酶原与酶原的激活 举例 酶原、酶原激活及酶原激活的本质 酶原激活的意义 某些酶原的激活 诱导作用(induction) 阻遏作用(repression) 溶酶体蛋白酶降解途径 非溶酶体蛋白酶降解途径 b c a 矩形双曲线和米-氏方程的对应关系 Ｖ＝ Vmax[S] Km + [S] V与[S]成正比为一级反应 Ｖ Vmax Km ≈ [S] V不成正比例加速,介于a、c之间, 为混合级反应。 达Vmax,V不再增加为零级反应 Ｖ Vmax ≈ a、 b、 c、 [S] Km时, [S] Km时， 初速度V Vmax 底物浓度[S] 1/2Vmax Km （一）米－曼氏方程式推导 米－曼氏方程式推导的条件： 推导过程： （二）Km与Vmax的意义 （三）Ｋm值与Ｖmax值的测定 0 V [E] 当[S][E]时，Vmax = k3 [E] [E]对V的影响 三、T对V的影响 四、 pH对V的影响 双重影响 最适温度 (optimum temperature)： —酶促反应速度最快时的环境温度 低温的应用 T升高→V↑ 最适pH (optimum pH) —酶催化活性最大时的环境pH。 T　→酶蛋白变性→V↓ 类型 不可逆性抑制 可逆性抑制 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive inhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) 五、抑制剂对反应速度的影响 酶的抑制剂( inhibitor/I ) —使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质 (一) 不可逆性抑制作用 什么是？ 抑制剂以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活； 不能用物理方法去除抑制剂。 举例： （二） 可逆性抑制作用 什么是？ 三种类型 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物 可逆性结合，使酶的活性降低或丧失； 抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 1、竞争性抑制 什么是？ 竞争性抑制的具体情形： 举例: I与E的S结构相似共同竞争E的活性中心， 防碍E与S的结合。 2、非竞争性抑制 什么是？ 非竞争性抑制的具体情形： I与E活性中心以外的必需基团结合， 不防碍E与S的结合， I与S之间无竞争 。 3、反竞争性抑制 什么是？ 反竞争性抑制的具体情形： I 只与ES结合成EIS，使ES的量减少， 影响产物的生成和E的释放。 三种可逆性抑制及无抑制作用的比较 与I结合的成分 E E、ES ES 动力学参数 表观Km Km 增大 不变 减小 最大速度 Vmax 不变 ↓ ↓ 林-贝氏作图 斜率 Km/Vmax 增大 增大 不变 纵轴截距 1/Vmax 不变 增大 增大 横轴截距 -1/Km 增大 不变 减小 作用特征 无I 竞 非 反 I I I 六、激活剂对反应速度的影响 激活剂(activator) 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质 分为 激活剂大多数为金属离子如Mg2+、K+、Mn2