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微生物基础知识及人员卫生 —孙 蓉 主要内容 一、微生物基础知识 二、GMP车间对微生物的要求 三、人员卫生 微生物基本概念 一切肉眼看不见的微小生物 微生物包括：细菌、酵母菌和霉菌，以及其他单细胞生物（真核生物）。 病毒并非真正的生物, 但通常也将它们归为微生物 大型真菌也属于微生物 微生物基本概念 微生物大小比较 微生物基本概念 微生物形态——细菌有多种不同的形态和形状：球菌、杆菌、弧菌等 微生物形态 微生物形态 微生物划线接种 微生物特性 单个微生物细胞是无法用肉眼看到的，除非大量的微生物细胞聚集在一起（菌落）。 在充足的生长条件下（营养、水、温度、pH值、有氧或无氧），微生物生长并繁殖。在固体培养基上形成菌落，或在液体培养基中出现浑浊。 菌落平板 细菌平板 微生物特性 当每毫升液体中存在 一百万个细菌时，肉眼才能看到出现浑浊！ 当一杯水中存在2亿个细菌时，才能被发现。 面前这瓶矿泉水看到细菌时，已经有3.5个亿的细菌了 微生物生长环境 微生物几乎无处不在：空气中，物体表面，水中以及动物的皮肤上......即使在恶劣的环境下微生物也能繁殖。 细菌具有“极强生命力”，如： 幽门螺杆菌 （存活在胃酸中 = pH 0.9-1.5） 延胡索酸火叶菌 （存活在深海中，最高温度 = 113 °C) 肉毒梭菌 （在厌氧条件下生存，可形成孢子） 芽孢杆菌（可形成孢子，可在干燥、热、紫外线和消毒剂存在的条件下存活很长时间） 细菌的生长 细菌是通过细胞分裂进行繁殖的（无性繁殖） 在理想的生长条件下，大肠杆菌每20分钟就繁殖一倍， 6小时40分钟后，一个细菌细胞翻了20倍，变成100万 个细菌细胞。 每个细菌都是潜在的危险！ 酵母菌和霉菌的特性 多数酵母菌是以单细胞形式存在的，霉菌是丝状真菌，以菌丝体形式存在。 酵母菌和霉菌的特性 真菌孢子能够在不利其生长的条件下（干燥、热、紫外线和消毒剂）存活很长时间，但它们不及细菌的内生孢子顽强。 酵母菌和霉菌的生殖 日常生活中的微生物 微生物引起的疾病 GMP车间的环境要求 GMP—优良生产规范 环境要求——对空气洁净度的要求，如：温度、湿度、静压差、空气流速、换气次数、尘埃粒子、沉降菌、浮游菌 级别——30万级的、10万级的、万级的、百级的。 空气洁净度影响因素 人员：80%的洁净室空气污染时来自人的皮肤碎屑、体液和油脂 微生物：病毒和细菌 颗粒：服装、皮肤和头发 GMP车间微生物环境要求 传播污染的四大媒介 空气：尘埃微粒 水：滋生微生物 表面：含水薄膜、吸附微粒 人：最常见的、最不清洁、永不休止的污染源 人体中典型微生物 口腔：链球菌、乳酸菌、杆菌 鼻腔和咽喉：大肠埃希菌、克雷伯氏菌、肠杆菌、类杆菌 肠内：肠杆菌、类杆菌 皮肤： 葡萄球菌、微球菌、杆菌 头皮：大量的致病菌： 金黄色葡萄球菌（达到30％） 、大肠埃希菌（达到20％）及葡萄球菌（10％） 人体微生物分布 微生物数量： 1. 头皮 1.5 Mill./cm2 2. 嘴 1 - 100 Mill./ml 3. 鼻-咽区 （败液） 1 Mill.- 10 Mill./ml 4. 非裸露皮肤（后背）500 - 1000/cm2 5. 分泌区 （腋窝） 2.4 Mill./cm2 6. 手 100 - 6000/cm2 7. 指尖 20 - 100/cm2 8. 脚100 - 1000/cm2 9. 胃 1000 - 10000/g 内含物 10. 小肠 1000 - 1 Mill./g内含物 11. 大肠 100 Mill. - 10 Bill./g内含物 12. 直肠 100 Bill./g 内含物 （= 10-20% 排泄物） 人体携带的微生物 人员发菌量 洁净室内当工作人员穿无菌服时: 静止时的发菌量为10～300个/(min·人)， 躯体一般活动时的发菌量为150～1000个(min·人)， 快步行走时的发菌量为900～2500个(min·人)； 咳嗽一次的发菌量为70～700个(min·人)， 喷嚏一次的发菌量为4000～60000个(min·人)； 有口罩发菌量：无口罩发菌量为(1:7)～(1:14) 发菌量：发尘量为(1:500)～(1:1000)； 可知洁净室内穿无菌衣人员的静态发菌量一般不超过300个(min·人)，动态发菌量一般不超过1000个(min·人) 咳嗽和打喷嚏会产生大量颗粒，其中含有大量的微生物。…高速相机拍摄的打喷嚏的照片.... 洁净室内人员对微生物的传播 药品生产中微生物