细胞培养概述—左琳.pptVIP

细胞培养概述 主讲人：左琳 细胞培养的条件 环境条件 1、进入培养室前要至少打开紫外灯照射30min 2、细胞室每周隔两三天打扫卫生，用0.2％的新洁而灭拖洗地面并擦拭实验室内各仪器表面。门把手等常易潜藏细菌的地方用75％酒精喷洒抑菌。 3、恒温水浴振荡器内的水每隔大约一周（水不澄清）更换一次，加两支硫酸庆大霉素。 4、培养箱托盘内的水定期更换，保证无菌。 超净工作台 1、使用前以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。 2、每次操作只处理一株细胞，以避免失误混淆或细胞间污染。 3、实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面。 4、工作台面上用品不要过多或重叠放置，否则会遮挡射线，降低消毒效果。 培养条件 ★ 气体环境：95％空气加5％CO2混和气体 环境中。 ★ PH值：7.2～7.4 ★ 温度：37℃ 培养用具的处理 1.清洗和浸泡: (1)玻璃器皿:新的玻璃器皿在生产过程中常使玻璃表面呈碱性，并带有一些如铅和砷等对细胞有毒的物质，使用前必须彻底清洗。首先用自来水初步刷洗，在5％稀盐酸溶液中浸泡过夜。然后用流水彻底冲洗3-5遍，单蒸馏水漂洗3遍，三（双）蒸水漂洗2遍，烘干备用。 （2）塑料器皿:塑料器皿经冲净后，晾干，用2％NaOH浸泡过夜，自来水冲洗干净，流水彻底冲洗3-5