HPLC法测定人血浆中万古霉素浓度的不确定度评定.docVIP

HPLC法测定人血浆中万古霉素浓度的不确定度评定 　　[摘要] 目的 评定液相色谱（HPLC）法测定人血浆中万古霉素（VCM）浓度的不确定度。 方法 采用Aglient ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为30 mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液-乙腈（91.5∶8.5 pH值3.38），流速1.1 mL/min，检测波长236 nm，柱温35℃。分析并评定HPLC法测定人血浆中VCM浓度过程中的不确定度来源并进行合成。 结果 人血浆中VCM低浓度（2.48 μg/mL）和高浓度（172.2 μg/mL）的扩展不确定度分别为0.168 μg/mL和9.64 μg/ mL（P = 95%，k = 2）。 结论 用HPLC法测定人体血浆中万古霉素浓度的不确定度在高浓度时主要由基质效应、生物样品的配制及重复性引入，在低浓度时主要由回收率、基质效应及生物样品配制引入。 　　[关键词] 高效液相色谱法；万古霉素；血清；不确定度 　　[中图分类号] R927.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）04（a）-0030-05 　　Uncertainty evaluation on the determination of vancomycinin human plasma by HPLC method 　　WANG Jiaqing ZHAO Zhigang MEI Shenghui 　　Department of Pharmacy， Beijing Tiantan Hospital， Capital Medical University， Beijing 100050， China 　　[Abstract] Objective To evaluate the uncertainty on the determination of vancomycin （VCM） in human plasma by HPLC method. Methods The chromatography was performed on an Aglient ZORBAX SB-C18 （4.6 mm×250 mm， 5 μm） column with the mobile phase consisting of 30 mmol/L potassiumdihydrogen phosphate-acetonitrile （91.5∶8.5， pH 3.38） at the flow rate of 1.1 mL/min. UV detection was set at 236 nm and the column temperature was set at 35℃. The uncertainty sources in the determinationof VCM were analyzed and the uncertainty was evaluated and combined. Results The expanded uncertainty of VCM at low （2.48 μg/mL） and high （172.2 μg/mL） concentrations were 0.168 μg/mL and 9.64 μg/mL respectively （P = 95%， k = 2）. Conclusion The uncertainty on the determination of VCM in human plasma by HPLC method is mainly caused by recovery， matrix effectand sample preparation for low concentrations， and the matrix effect， sample preparation and repeatability for high concentrations. 　　[Key words] HPLC method； Vancomycin； Human plasma； Uncertainty 　　万古霉素（vancomycin，VCM）属于三环糖肽类抗菌药物，临床上主要用于敏感革兰阳性菌，特别是严重耐药的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌所致的感染，因为此药有耳、肾毒性和血栓性静脉炎等严重的不良反应，故临床应用时常进行血药浓度监测以调整给药方案[1]。万古霉素、去甲万古霉素的浓度测定方法国内外多有报道[2-5]，本实验建立了用HPLC法测定血浆中VCM的浓度。本文采用了测量不确定度来评价分析测试结果的质量。当不确定度值越小时，