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酶工程 第一章 绪论 第一节酶工程的研究内容 第二节生物催化 第三节 国内外酶制剂工业概况 第一节 研究内容 一．概念： 二．酶工程研究简史 三．研究内容 酶工程（ Enzyme Engineering） 酶的生产、改性与应用的技术过程。是酶学和工程学相互渗透结合形成的一门新的技术科学，是酶学、微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的边缘科学。 这门学科在研究内容、手段和目的上与基因工程、蛋白质工程、细胞工程、发酵工程等孪生学科是相互交融的。 酶的生产（enzyme production）是指通过各种方法获得人们所需的酶的技术过程，主要包括微生物发酵产酶、动植物培养产酶和酶的提取与分离纯化等。 酶的改性（enzyme improving）是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶定向进化等。 酶的应用（enzyme application）是通过酶的催化作用获得人们所需的物质或者除去不良物质的技术过程，主要包括酶反应器的选择与设计以及酶在各个领域的应用等。 酶工程的主要任务是经过预先设计，通过人工操作获得人们所需要的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。 二. 酶工程研究简史 1894年，日本的高峰让吉首先从米曲霉中制备得到淀粉酶（又称高峰淀粉酶），用作消化剂，开创了近代酶的生产和应用的先例。 此后近半个世纪的时间里，都是停留在从动物、植物或微生物细胞中提取酶并加以应用的阶段。 1916年美国的奈尔森（Nelson）和格里芬（Griffin）发现蔗糖酶吸附在骨炭上后，仍然显示出催化活性。 1949年，日本开始采用微生物液体深层培养方法进行细菌α-淀粉酶的发酵生产，揭开了现代酶制剂工业的序幕，发酵工程技术发展使酶的生产得以大规模发展。 1960年，法国的雅各布（Jacob）和莫诺德（Monod）提出操纵子学说，阐明了酶生物合成的调节机制，从而显著提高了酶的产率。 20世纪80年代迅速发展起来的动植物细胞培养技术，继微生物发酵生产酶之后，已成为酶生产的又一种途径。 随着酶生产的发展，酶的应用越来越来广泛。由于酶具有专一性强、催化效率高、作用条件温和等显著的特点，在医学、食品、轻工、能源、环保和科研等领域广泛应用。 1953年，德国的格鲁布霍费（Grubhofer）和施来斯（Schleith）首先将聚氨基苯乙烯树脂重氮化，然后将淀粉酶、胃蛋白酶、羧肽酶和核糖核酸酶等与上述载体结合，制成固定化酶。1969年，日本的干畑（tián）一郎首次在工业上应用固定化氨基酰化酶进行DL-氨基酸拆分而产生L-氨基酸，从此学者们开始用“酶工程”这个名词来代表酶的生产和应用的科学技术领域。 固定化酶的研究始于1910年,正式研究于20世纪60年代,70年代已在全世界普遍开展 。 在固定化酶的基础上，又发展了固定化细胞（固定化活细胞或固定化增值细胞）技术。1978年，日本的铃木等用固定化细胞生产α-淀粉酶研究成功。此后，采用固定化细胞生产蛋白酶、糖化酶、果胶酶、溶菌酶、天冬酰胺酶等的研究相继取得进展。 1986年，我国学者郭勇等采用固定化原生质体生产碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶、谷氨酸脱氢酶等的研究相继成功，为胞内酶的连续生产开辟新途径。 1984年，克里巴诺夫（Klibanov）等进行了有机介质中酶的催化作用的研究，发现脂肪酶在有机介质中不但具有催化作用，而且还具有很高的热稳定性，改变了酶只能在水溶液中进行催化的传统观念。此后，有机介质中酶的催化作用的研究迅速发展。 20世纪80年代以来，酶分子修饰技术发展很快，修饰方法主要有：酶分子主链修饰、酶分子侧链基团修饰、酶分子组成单位置换修饰、酶分子中金属离子置换修饰和物理修饰等。 随着易错PCR（error-prone PCR）技术、DNA重排（DNA shuffling）技术、基因家族重排（gene family shuffling）技术等体外基因随机突变技术以及各种高通量筛选（high-throughout screening）技术的发展，酶定向进化（enzyme directed evolution）技术已经发展成为改进酶催化特性的强有力手段。 酶的定向进化是一种快速有效地改进酶的催化特性（底物特异性、酶活性、稳定性、对映体选择性等）的手段，通过酶的定向进化，有可能获得具有优良特性的酶分子。酶的定向进化技术已经成为酶工程研究的热点。 经过100多年的发展，酶工程已经成为生物工程的主要内容。在世界科技和经济的发展中起重要作用。 酶工程的主要内容包括：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反应器和酶的应用等。 微生物