亮氨酸二肽与小牛胸腺DNA的相互作用研究.pdfVIP

第44卷专辑 西北师范大学学报(自然科学版) 489 亮氨酸二肽与小牛胸腺DNA的相互作用研究 曹伟娜1，卢奎1，扣，马丽1，赵东欣1 1河南工业大学 化学化工学院，郑州(450001) 2河南工程学院，郑州(451191) 摘要：利用紫外-可见光谱法、循环伏安法和黏度法研究了亮氨酸二肽与小牛胸腺DNA 的相互作用．随着DNA浓度逐渐增加，Leu-Leu．DNA体系的紫外光谱呈现减色效应，亮 氨酸二肽的还原峰电流增大，电位发生负移且二肽对单双链DNA有不同的识别作用；DNA 溶液的黏度随着亮氨酸二肽浓度的增大而逐渐降低。以上实验结果表明二者之间的作用模 式为静电结合和沟槽结合的混合作用模式． 关键词：亮氨酸二肽；小牛胸腺DNA；相互作用 本文利用紫外可见光谱法、循环伏安法和黏度法对亮氨酸二肽和小牛胸腺DNA的相 互作用进行了研究。 1．实验部分 1．1仪器和试剂 州瑞斯特仪器有限公司)，乌贝路得黏度计。 为底液，配制其储备液，于O～4℃下保存，其纯度以260姗与280nm处吸光度的比值检测 (A2∞皿／A2∞嘲=1．871．8)；亮氨酸二肽，本实验室合成鸭其它试剂均为分析纯，实验用 水为二次蒸馏水。 1．2实验方法 的二肽溶液，用pH=7．2的Tris．HCl缓冲液稀释至10mL，于37℃水浴30min。扫描其光 谱曲线(石英比色皿厚度为1cm)，二肽及其与DNA复合物的紫外光谱均以Tris．HCl溶液 作参比。 循环伏安法：在20mL比色管中依次加入2．0mL2．5×10。3mol·Ld的亮氨酸二肽溶液和 min， 一定量的DNA溶液，用pH=7．15的Tris．HCl缓冲液稀释至刻度，摇匀。于37℃水浴30 V之间的循环伏安图。 然后用RST-3000电化学分析记录仪扫描范围在．1．0．1．0 黏度法：在一系列25mL的容量瓶中，固定小牛胸腺DNA溶液浓度为1．2×10‘4mol·L一， 逐渐增加二肽的浓度，于37℃水浴lh，即得到黏度测试液。然后在(28士0．1)℃的恒温 水浴中测定小牛胸腺DNA溶液的黏度随着二肽浓度的变化，每个测试液重复测量三次， 每次相差不超过0．2s，取平均值。 测试液的相对黏度按下式计算I’l： Tl=(t·t0)／to 式中t0为缓冲溶液流经毛细管所需的时间，t为DNA溶液(含浓度不等的亮氮酸二肽)流 490 全国第十四届大环化学暨第六届超分子化学学术研讨会论文专辑 经毛细管所需的时间。以(T1／T10)173对二肽的浓度作图，可以得到二肽对DNA黏度的影响。 其中T10为未加入二肽的DNA溶液的相对黏度。 2．结果与讨论 2．1亮氨酸二肽与小牛胸腺DNA相互作用的紫外光谱研究 光l扫■_ ^ | ＼ 『^ ／咖 | r 【矗I．D∞晡 {脚赫 …”…Y……～， ＼、√ 辽 图lCT-DNA和L讹·Lcu．DNA体系的紫外吸收光谱 与亮氨酸环二肽同时存在时的紫外吸收光谱图。从图中可以看出，当亮氨酸二肽与CT-DNA 相互作用后，在258姗处显示最大吸收，