从深海沉积物中筛选具有抗菌、抗肿瘤活性的海洋真菌.pdfVIP

疆毽覆n 第三届海洋生物育技术论坛 2005．08．19-23 从深海沉积物中筛选具有抗菌、抗肿瘤活性的海洋真菌+ 熊枫郑忠辉4黄耀坚宋思扬徐庆妍苏文金 (厦f1大学生命科学学院， 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室，福建厦门361005) 摘要：从西太平洋近赤道区采集到的18个深海沉积物样品中分离到83株海洋真菌，采用滤纸 片琼脂扩散法和MTT法分别对其发酵液乙酸乙酯抽提物的抗菌、抗肿瘤活性进行筛选。结果显 示，有37株菌株对至少一种细菌或真菌有抑制作用；有29株菌株对KB或Raji肿瘤细胞具有 显著的抑制活性，分别占总供测菌株的44．6％和34．9％。在抗肿瘤活性菌株中，WP-M．I、DY·G一2、 丰富的抗菌及抗肿瘤活性代谢产物产生菌，是开发抗菌和抗肿瘤药物的宝贵资源。 关键词：海洋沉积物；海洋真菌；抗菌活性；抗肿瘤活性 长期以来，国内外开发天然产物药物的重点一直集中在陆生生物资源，现有的天然产物药 物大多数也都来自陆生生物。然而，由于对陆生生物资源的长期研究开发，目前从陆生生物代 谢产物中发现新药或先导化合物的几率大幅度地下降，例如，近年来从陆生微生物分离到的活 性代谢产物有95％以上都是已知的化合物。因此，自上世纪60年代来，人们开始重视海洋天然 产物药物的研究开发。 海洋微生物是海洋生物的重要成员，这类海洋生物不但物种多样性比海洋动植物更加丰富， 而且与其他海洋生物一样可产生与陆栖生物结构不同的具有抗菌、抗肿瘤、抗蛋白酶、抗病毒 药理活性物质。此外，海洋微生物还具有可以利用现代微生物发酵技术进行生产、不会破坏生 态平衡，无原材料后顾之忧、易实现产业化等优势，被认为是最具开发前景的可持续性利用药 源。在海洋微生物代谢产物研究方面，国内外对海洋细菌和放线菌的活性天然产物的研究起步 较早，研究较深入，发现的新化合物的数量也较多。相比之下，国内外对海洋真菌的系统研究 起步较迟，对其代谢产物化学及生物活性的研究水平远不及海洋细菌和放线菌，据报道从1970 年至1993年从海洋真菌中发现的新化合物不到35个，直到1990年开始，发现新化合物的速率 才有所增加，进入较快速的发展阶段…。目前已从海洋真菌中分离到近300个具有抗肿瘤、抗 菌及抗病毒等生物活性的新化合物，表明海洋真菌中蕴藏着许多具有潜在应用前景的活性物质， 是开发新抗菌、抗肿瘤药物及其它新药的重要资源。 本文对采自西太平洋近赤道区的18个深海沉积物样品中的真菌进行了较为系统的分离，并 从中筛选抗菌、抗肿瘤活性物质产生菌，旨在发掘具有潜在应用前景的抗菌、抗肿瘤活性菌株， 为开发新的微生物药物奠定基础。 +国家863计划(2003AA624010)和福建省科技计划项目(2004N003)资助 4通讯作者：zhzheng@jingxian．xmu．edu．crl 317 福建曩n 第三届海洋生物育技术论坛 2005．08．19．23 l材料与方法 1．1材料 1．1．1样品来源 19024．0829’一124058．2958’W)，由国家海洋局第三研究所提供。 1．1．2培养基 dextrose 分离培养基：马铃薯葡萄糖培养基(PDA，Potatoag神¨1。 dextrose broth)培养基，葡萄糖蛋白胨酵母 发酵培养基：马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB，Potato 膏(GPY,Glucoseyeast)：暗养基【3】o peptone 抗菌测定培养基：牛肉膏蛋白胨培养基【4】，PDA培养基。 ParkMemorial 细胞培养基：RMP(Roswell 过滤除菌。 1．1．3肿瘤细胞株 人U腔上皮癌KB细胞购于中科院上海细胞所；人B淋巴瘤Raji细胞由厦门大学生命科学院 兄弟实验室惠