从衣康酸发酵废弃菌丝体中提取壳聚糖的研究.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次全国发酵工程学术讨论会论文集 从衣康酸发酵废弃菌丝体中提取壳聚糖的研究 李丕武，刘春生， 赵祥颖， 田延军， 刘建军 (山东省食品发酵工程研究重点实验室，济南250013) 摘要：本文研究了从衣康酸发酵废菌体——土曲霉中提取壳聚糖的工艺条件。首先对菌 体的成分进行分析，参照国内外研究者生物法提取壳聚糖的方法，建立衣康酸发酵废菌丝体 提取壳聚糖的工艺。通过正交实验，研究确定了土曲霉菌丝体脱蛋白和脱乙酰的最佳条件， 壳聚糖的提取率为9．548％，将实验室得到的壳聚糖与虾、蟹壳中提取的商品壳聚糖用红外 光谱法进行鉴定，证明二者的主要成分一致，初步确定土曲零茵丝体能够作为提取壳聚糖的 原料． 前言 衣康酸作为一种新型的化工中间体，随着其用途的不断延伸及生产成本的下降，市 场需求逐年增长，目前国内的生产规模已经达到十万吨并有进一步扩大的趋势。在衣康 酸发酵过程中会产生大量的土曲霉菌丝体，由于适口性差，不能直接作为动物饲料，尤其 在夏季高温条件下长期堆存会产生难闻的气味，菌体自溶后产生的污水也会严重的污染 环境，所以通常被填埋或用锅炉烧掉，既造成了污染又不能产生任何价值。真菌菌丝体 中主要成分是蛋白质和甲壳素，利用废弃菌丝体提取壳聚糖，已经有成功的先例Ⅲ，因 此，本文将探讨以衣康酸发酵废菌体土曲霉菌丝体为原料，提取壳聚糖的可能性，不仅有 可能寻找新的壳聚糖生产原料，降低壳聚糖的生产成本，而且为搞好资源的充分利用，把 发酵废渣的排放降到最低点，提供了一条新途径。 1 材料与方法 1．1实验材料 1．1．1实验用废菌丝体：吉林华侨农场生化公司和五莲凯翔生化公司衣康酸生产废弃 菌丝体。 1．1．2壳聚糖标准品：济南海得贝公司生产的商品壳聚糖 其它药品均为分析纯 1．2实验方法 1．2．1蛋白质的测定方法 蛋白质的测定采用微量凯氏定氮法[GB／T14771—93] 1。2．2灰分的测定： 将称得的样品，先在电炉上烧至无烟，再放进马福炉中550摄氏度灼烧直至恒重。 1．2．3粗脂肪的测定 6lO 第四次全国发酵工程学术讨论会 索氏抽提法‘6] 1．2．4粗纤维的测定 参见GB／T5009．10—2003中粗纤维的测定方法。 1．2．5壳聚糖的鉴定C7] 红外光谱法：FTIR一8400S傅里叶变换红外光谱仪，KBr压片法。 2 结果与讨论 2．1菌体成分的测定结果 收集衣康酸生产的废弃土曲霉菌丝体，烘干后粉碎，测定菌丝体中各种成分的含量， 结果见表3—1。 通过分析可知，衣康酸发酵菌丝体中 表3-1土曲霉菌体成分测定结果 主要成分为蛋白质和粗纤维，其中蛋白质 成分 含量(％) 部分可以用碱法脱去，做为蛋白饲料出 蛋白质 47．12 售，由于粗纤维的测定采用重量法，因此 粗纤维 30．7 粗脂肪 4．04 细胞壁中的壳聚糖及其前体甲壳素也都 灰分 2．01 包含在这一部分中，因此从衣康酸废菌丝 体中提取壳聚糖，并分离菌体蛋白，具有综合利用的价值。 2．2从衣康酸废菌体中提取壳聚糖工艺的研究 衣康酸发酵菌丝体为土曲霉，参照其它真菌提取壳聚糖的通用方法阻5’争10]，本研究拟 采用以下工艺流程，初步探讨衣康酸废菌丝体提取壳聚糖的可行性。 氢氧化钠溶液 山r一滤清液—等电点沉淀—◆菌体蛋白 菌丝体～卜脱蛋白——◆过滤一 L残渣◆甓乙酰斗过滤r残渣◆几丁质 鑫 k