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第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 PL—06 基于分子工程和纳米技术的生物检测与分离新方法木 王柯敏” 湖南人学化学生物传感与计量学国家重点实验室，湖南大学化学化工学院，湖南大学生物医学工程 中心，生物纳米与分子工程湖南省重点实验室，长沙410082 关键词：分子工程，纳米技术，微流控芯片，纳米颗粒 将分子工程技术、生物纳米技术和微流控芯片技术相结合，发展了一系列适合微量样品高灵敏 检测和高效分离的新方法，有望在色谱分析研究中得到应用。 基于核酸分子探针和工具酶的特异性相互作用，发展了核酸片段传感(Nucleotide Fragment Sense，NTFS)技术平台，实现了核酸连接、磷酸化等重要生命过程的实时信息获取，并将其与微 流控芯片技术相结合，建立了微量样品中ATP等重要生物小分子的高灵敏、高特异性检测方法。 基于核酸分子探针技术、纳米颗粒技术的最新研究成果，构建了一维微流控微珠阵列芯片技术 平台。该平台既具有阵列芯片通量高，可进行多因子同步分析的特点，又具有微流控芯片集成度高、 反应速度快、试剂消耗低的特点，且便于操作。已用于多种肿瘤侵袭相关基因表达的研究，检测不 同细胞肿瘤相关基因的突变热点，为肿瘤的基础研究、早期诊断以及药物筛选提供了强有力的研究 手段。 基于表面等离子体共振技术(SurfacePlasmonResonance，SPR)和纳米金颗粒信号放大技术， 发展了用于痕量分析的高灵敏、高选择性DNA传感器，对于复杂生物样本的检测具有重要的实用价 值。利用SPR技术还研究了固定化DNA单层的电致开关行为，并通过电场调控固定化DNA探针的 取向，提高了检测灵敏度。 采用荧光染料嵌入的功能化核．壳纳米颗粒代替传统的荧光染料对生物分子进行修饰，建立了一 种新型生物荧光标记方法。基于这一新型标记方法，很好地实现了包括肝癌、胃癌等体外培养的肿 瘤细胞、血液混合细胞中的肿瘤细胞、裸鼠移植瘤分离的肿瘤细胞、裸鼠移植瘤肿瘤组织切片、裸 鼠移植瘤活体的高灵敏检测，以及抗肿瘤药物作用后肿瘤细胞凋亡程度与凋亡过程的实时监测；构 建了结核杆菌、SARS病毒等重要病原微生物快速、灵敏检测的新技术。 基于氨基化硅壳纳米颗粒／氨基化硅壳磁性纳米颗粒与质粒DNA的静电吸附原理，建立了基于 氨基化硅壳纳米颗粒／氨基化硅壳磁性纳米颗粒的质粒DNA快速分离纯化方法，该方法免去了传统 分离纯化质粒DNA的酚／氯仿法的毒副作用和操作繁杂等缺点，为DNA的分离纯化提供了一种新的 手段。基于静电吸附和亲和吸附分离原理，开展了氨基化硅壳磁性纳米颗粒／硅壳磁性纳米颗粒在蛋 白质分离中的应用，为蛋白质分离、纯化提供了新的分离介质和研究手段。 参考文献 et Acids a1．，NucleicRes．，2005，33(11)，e97 【I】Z．Tang，K．Wang，W．Tan et 『21 C．Ma,Z．Tang，K．Wanga1．，ChemBioChem，2007，8(13)：1487-1490 ’国家自然科学皋会20620120107)资助项目 “通讯联系人，f柯敏，Email：kmwang@hnu．cn 9 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 et 1 【3】L．Zhou，K．Wang，W．Tanga1．，Anal．Chem．，2006，78(17)：6246-625 et 【4】J．Wen，X．Yang，K．Wang a1．，Biosens．Bioelectrort，2007，22(11)：2759．2762 et 【5】H．Zhang，X．Yang，K．Wang a1．，Electrophoresis