气相色谱-质谱法测定出口蔬菜中18种保鲜剂残留.doc

QuEChERS/GC-MS法快速检测出口蔬菜中16种保鲜剂残留 周雪1 曹淑瑞2 李贤良2 郗存显2 徐芬2 陈志琼*1 1(重庆医科大学药学院，重庆 400016) 2 (重庆出入境检验检疫局，重庆 400020) 摘 要 采用分散固相萃取（QuEChERS）前处理方法结合气相色谱-质谱法（GC-MS）建立出口蔬菜中16种保鲜剂残留量的快速检测方法。以叶菜类、茄果类、豆类、瓜类和块茎类出口蔬菜为原料，样品经乙腈提取，QuEChERS除杂净化，用GC-MS外标法定量。16种保鲜剂在0.02~2mg/L的范围内线性关系良好，相关系数为0.9990~0.9997，检测限（LOD，S/N=3）在0.004~0.965μg/kg范围内。以0.01、0.02、1mg/kg添加浓度水平进行方法学验证，回收率为76.7%~120.0%，相对标准偏差为2.1%~10.6%。与已报道的GB/T 19648-2006等相比，本方法具有快速、简便、灵敏度高等特点，能满足出口蔬菜中16种保鲜剂残留的检测要求。 关键词 分散固相萃取；出口蔬菜；保鲜剂；气相色谱-质谱法 1 引言 内陆蔬菜出口长距离运输易腐败变质[1]，不规范使用或滥用蔬菜保鲜剂是导致保鲜剂超标的主要原因。蔬菜保鲜剂主要分为天然保鲜剂和化学保鲜剂，由于化学保鲜剂价格低廉且易于操作，故在蔬菜储藏运输中应用较广[2]。化学保鲜剂大多为农药，其残留量过大不仅会影响出口蔬菜的质量，还严重威胁着消费者的健康，有些保鲜剂即使少量残留也可能导致癌症及一些神经系统和生殖系统疾病的发生[3-4]。众多的检测项目和较长的检测周期不仅给新鲜蔬菜收购、出口通关带来不便，还导致蔬菜保鲜品质下降。研发多种保鲜剂残留同时、快速、高灵敏度的分析方法，对提升出口蔬菜中保鲜剂残留的检测水平和监管力度起着重要作用。 常用的保鲜剂残留检测方法主要有免疫分析法[5]、生物传感器[6]、毛细管电泳[7]、液相色谱法[8]、液相色谱-质谱法[9]、气相色谱法（GC）[10]和气相色谱-质谱法（GC-MS）[11]等。其中，GC的分离效能高、分析速度快，质谱则提供准确的结构信息，GC-MS已成为多种保鲜剂残留分析最为有力的方法之一。谢建军等[12]采用GC-MS法对果蔬中嘧霉胺、百菌清、丙环唑、三唑酮等多种保鲜剂残留同时检测进行了报道。崔淑华等[13]应用GC-MS法对果蔬中腈菌唑、丙环唑、三唑酮等保鲜剂在内的193种农药残留同时进行了检测。由于各种保鲜剂理化性质的差异性，同时检测多种保鲜剂残留的样品前处理方法需满足较宽范围的化合物，如直接对样品进行稀释或以固相萃取小柱进行净化，前者未能去除杂质，干扰较多；后者耗时较长，不利于通关放行。分散固相萃取（QuEChERS）是近年来国际上最新发展起来的一种用于农产品检测的快速样品前处理技术,该方法不仅能有效净化样品，还具有耗时短、操作简便、使用溶剂少等优点。 本研究对出口蔬菜中同时提取16种保鲜剂的溶剂进行了筛选，同时考察了乙酸铵缓冲溶液的作用，优化了QuEChERS等净化条件，充分利用了GC-MS分离效率高、灵敏度高、专属性强的优点，建立了同时快速检测出口蔬菜中16种保鲜剂残留量的方法。该方法具有高的准确度和精密度，可为出口蔬菜中保鲜剂残留量的快速检测提供技术支持。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 7890-5975C气相色谱-质谱仪（美国Agilent公司）；BS224S型天平（德国Sartorius公司）；涡旋振荡混合器（江苏康健医疗用品有限公司）；3-30K台式高速冷冻离心机（德国 Sigma公司）；4011 Digital旋转蒸发仪（德国Heidolph公司）；Eppendorf移液器（可调范围：10~100μL，20~200μL，10~1000μL，1000~5000μL，1~10mL，德国Eppendorf公司）。 16种保鲜剂标准物质（纯度均≥99%，美国AccuStandard公司）；乙腈、丙酮、乙酸乙酯、正己烷、甲苯（色谱纯，美国Tedia公司）；PSA(乙二胺-N-丙基硅烷，粒度60μm)、ODS(十八烷基硅烷键合硅胶、C18，粒度60μm)均购于美国Agilent Technologies公司；C18固相萃取柱（6mL，0.50g）、活性炭固相萃取柱（6mL，0.50g）、NH2固相萃取柱（6mL，0.50g）、ENVI-CARB/LC-NH2固相萃取柱（6mL，0.50g）均购于美国SUPELCO公司；无水硫酸镁、氯化钠、乙酸铵均为国产分析纯试剂；实验用水为Milli-Q超纯水系统（美国Millipore公司）制备的超纯水；蔬菜均购于当地各大型超市。 2.2 标准溶液配制 准确称取各标准物