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新城疫分离株疫苗免疫保护试验 王玉珠1，李庆锁2，李杰峰1，孙继国“，刘虹z，王爱华3 (1．河北农业大学动物科技学院，河北保定，071001；2．河北省畜牧兽医研究所，河北保定，071000； 河j匕北方学院动物医学系，河北宣化，075131) 摘要：用经过鉴定的新城疫病毒分离株按国家兽医生物制品质量标准制各油乳剂灭活疫苗，与标准的LaSota疫 苗分别免疫带有新城疫母源抗体的自来航鸡，免疫后每7天采血监测新城疫抗体，并于免疫后21天、28天、35天 用鸡新城疫分离毒和F48E9分别进行人工感染试验。结果显示，分离株灭活苗对鸡新城疫分离株的免疫保护效力优于 LaSota灭活苗。 关键词：新城疫免疫保护人工感染 鸡新城疫一直是危害我国养禽业的一种重要传染病，长期的综合防治曾使该病的暴发流行日趋 减少。但近几年来，该病在我国一些省市免疫鸡群频频暴发，给养禽业造成了严重的损失。国内学 者对新城疫的流行持不同看法，一些学者认为新城疫的发生是由于鸡群长期、大剂量、多次使用疫 苗。在强大的免疫压力下出现了新的变异株，使传统疫苗株不能有效控制该病流行【11【2】；而另一些学 者认为是免疫抑制病以及疫苗质量引起。本研究采用从河北某鸡场分离的新城疫强毒株制成疫苗， 和常规LaSota疫苗进行免疫保护试验，旨在探讨分离株的抗原性是否发生了改变，从而为制定科学 的新城疫防制措施提供有力的依据和支持。 ’ 1材料 1．1病毒株 1．1．1新城疫分离株HBW、HBB由河北省畜牧兽医研究所2000年从保定两鸡场分离。经系统病毒 时，ICPI为1．96，该毒株用于攻毒强毒株。 1．1．2新城疫标准毒F48E9强毒 购子中国兽药监察所，经SPF鸡胚增殖三代，毒价为 108·ELD50／0．1ml，HA为1：256，为攻毒强毒株。 12普通疫苗新城疫LaSota油乳剂灭活疫苗中国农科院哈尔滨兽医研究所生产，批 1．3鸡胚 1．3．1 SPF鸡胚购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司，自行孵化，用于毒种繁殖及病毒滴度 测定。 1．3．2非免疫鸡胚．购自北京家禽孵化实验厂，用于疫苗抗原液制备。 1A实验鸡由保定路园种鸡场购入1日龄自来航鸡公雏，自行饲养至8日龄进行免疫。 2方法 2．1疫苗制备 2．1．1疫苗抗原液制备及毒价测定将HBW株用灭菌生理盐水适当稀释后，接种9日龄非免疫鸡胚， 按常规方法收获尿囊液，HA价为l：256。 2．1．2抗原液灭活将10％甲醛滴加入病毒尿囊液中，使甲醛终浓度为O．2％，在37℃灭活16小时以 上。经灭活检验合格后作为制苗抗原液。 2．1．3油相佐剂制备把专用白油、司本．80和硬脂酸铝按一定比例混合，经高压灭菌后备用。 2．1A疫苗水相制备将一定比例吐温．80高压灭菌后，加入到已灭活抗原液中，经充分溶解混合即 为水相。 2．1．5灭活苗制备将一定比例的油相和水相在立式胶体磨中乳化，制成油包水型油乳剂灭活苗。 ’作者简介：王玉珠(1970．)，女，河北邯郸市人，在读硕士生，从事预防兽医研究 通讯作者：孙继国(1956．)，男，河北故城人，教授，Email：Sunjigu02000Ca哆ahoo朋m．衄 2．2免疫保护试验 2．2．1免疫方案将240只8日龄雏鸡随机分为三组，第1、Ⅱ组分别用HBW和LaSota灭活苗颈部 皮下注射O．2ml，只，对照组不接种任何疫苗，各组在相同条件下饲养。分别于免疫前和免疫后第7、 14、21、28、35、42天监测新城疫m抗体，每组取5个样品。 稀释为10．3，0．2nll／只，胸肌注射，每种毒攻5只鸡，攻毒后观察14天。 3结果 3．1免疫情况及抗体消长曲线疫苗免疫后，鸡外观、食欲均正常，疫苗接种部位无红肿现象。分 别在免疫前和免疫后7、14、21、28、35、42天采血检测新城疫病毒抗体，结果详见表1和图1。 表1 免疫后不同时期各组抗体效价(L092) TableThetiter atdifferent 1 ofHl antibody dayspost-inoculation(L092)