氧自由基检测方法在生物学和医学中的应用.pdfVIP

1999年7月 第1 6卷第3期(总第64期) 1 7 ，7～ 氧自由基检测方法 在生物学和 学中的应用 ＆一； 扬堡收 ，陈 越 ，金久善 ，董 梅。 (1·内蒙古农牧学院 动物医学系，内蒙古 呼和浩特 010018~2·中国农业大学 动物医学院，北京 100094 3．解放军309医院生化检验科，北京 100091) 摘 鼻：从方法学角度出发，垃圭境地舟绍了五大麦氧自由基的特测方法——电千顺磁共杯波谱法、化 学发光法、化学比色法、分析羟化产轴法和气相色谱法的桂剖对象、方法评价夏其在生物学和医学研览 中的具体应用，为探讨氧自由基的生物学作用提供一了髓 方法上的选择 关■调；氧自由基 熊型立溘 0 } 1函 中田分类号：Q一331 文献标识码：A 文章编号：1008--9381(1999103--0O17—03 1 电子顺磁共振波谱法(EPR)与自旋捕捉法 于1952年发表了 生物发光”专著。随着生物发光研究的不断 1．1 EPR简介 深入，发现机体的器官、组织、细胞乃至大分子物质都在发光， 电子顺礁共振波谱(Electron Paramagnetic Res。nance， 不过其发光强度很弱，称之为超弱发光或低水平的化学发光 EPR)也称为电子自旋共振没谱(E~ectmn Spin Resonance， 2·2 CL应用 ESR)是指从不成对电子(即单电子)的礁矩发出的一种礁共 Allen RC等(1972) 首先发现了吞噬细胞在其吞噬活动 振波谱，它利用具有单电子物质在静电磁场中吸收电磁波的 中产生的化学发光现象，自此开创了化学发光分析技术在医 能量完成电子在能级间跃迁的特性，对上述顺磁性物质进行 学、生物学研究中的新局面。大量研究表明，许多疾病的病因、 幢j到与分析。 病理过程或药物治疗机制与氧自由基有直接或间接关系，因 1．2 EPR应用 此，应用化学发光法测量机体氧自由基含量对探索这些疾病 自从1954年美、法学者将EPR技术首次引入生物学研究 的病因、发病机制、诊断与防治及药物开发等具有主要的作 领域以来，EPR分析方法在生命科学研究中得到了广泛应用， 用。研究表明，伴随着衰老，机体内氧自由基含量增加，机体组 尤其是在氧自由基捡j到方面多见报道。肖华山等人应用EPR 织器官或血清的化学发光值也随之升高。当机体发生炎症时， 和自旋捕捉剂DMPO相结合直接测定了过硫酸胺一N，N，N ， 由于o 等活性氧增加，氧化血中脂质，使血清自发化学发光 N。。四甲基二胺(AP·TEMED)体系产生的氧自由基，经计算 增高，急性炎症时高于慢性炎症，这种方法及建立的指标不仅 机波谱模拟和计算渡谱参数证实该体系产生的氧自由基是 可用于动物炎症的病理模型和药理研究，临床上也可用于疾 0 -和·OH。陈越、史言等 一应用EPR技术观察了Ge一132对 病的鉴别诊断，例如慢性胰腺炎患者的血清自发化学发光值 机体免疫器官氧自由基含量的影响，证实了Ge一132能降低健 鞍健康人高出3～4倍，而急性胰腺炎患者则高达6～7倍。西品 康雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏中氧自由基含量，Ge一132是体内氧 香等通过观察经调理的酵母多糖等几种白细胞刺激剂引起的 自由基的清除剂。于玲范等嘲在低温下应用EPR技术直接检 大鼠腹腔中性粒细胞的化学发光和次黄嘌呤一黄嗓呤氧化酶 j到了大荆量维生紊Di致大鼠心肌损伤时肌中氧自由基含量的 系统(HX—XO)产生的化学发光，发现丹参单体764—3能直接清 变化，井观察到L一甲硫氨酸对受损心肌具有保护作用 廖堆靖