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玉米秸秆纤维素酶水解影响因素研究 张全方向晨佟明友 11 (中国石油化工股份有限公司抚顺石油化工研究院抚顺 3001) 摘要：本文通过从预处理，纤维素酶加入量，初始葡萄糖浓度等方面考察了纤维素酶水解玉米 秸秆的影响因素。玉米秸秆在利用纤维素酶水解之前需要经过预处理才能获得较高的酶解得率，稀 酸预处理和蒸汽爆破预处理玉米秸秆的酶解得率分别为97％和9l％。提出了一个衡量预处理好坏的 参数I／C，其中I是指利用X一衍射仪测试玉米秸秆粉的积分强度，C为玉米秸秆粉的纤维素含量。对 比了几种纤维素酶对蒸汽爆破玉米秸秆水解的效果，结果发现纤维素酶液的滤纸酶活高，不一定对 预处理原料的水解能力也高，还取决于纤维素酶中酶的组分是否合理。纤维素酶解体系中，酶加入 量越多，平均葡萄糖生成速率(GR)越大，另外，随着初始葡萄糖浓度(C)的增加，体系中的GR 呈递减趋势，说明葡萄糖对纤维素酶水解具有反馈抑制作用。 关键词：纤维素酶玉米秸秆 水解 预处理 随着世界人口的增加和各国工业化程度的提高，能源的消耗也在稳步增加。石油是 满足能源需求的主要资源，但是石油资源是有限的，科学家们预测2050年原油的生产 将由现在的每年250亿桶下降到50亿桶【11，而生物燃料作为交通工具的能源能够降低 室温效应，减少环境污染以及改变不平等的供求关系和保持持续供应，比矿质燃料更具 有优势娴。在所有生物燃料中，乙醇的生产已经具有了相当规模(2002年全球大约17 兆吨【4】)，是可以通过糖发酵获得的可再生能源。我国年产7亿吨秸秆，另外还有大量被 废弃而未加利用的纤维物，如小枝、树皮、树叶、屑和废纸等，这些加起来每年约有五 亿吨。每年利用其中的l亿吨即可达到2000万吨／a的燃料乙醇生产能力。因此开发木 质纤维素生产乙醇的新工艺具有很好的前景。 目前由木质纤维素转化为乙醇的研究非常活跃；这一领域已取得许多新的进展【5’6l。 木质纤维素的生物转化一般包括3个过程：即原料的预处理、水解和发酵。其中利用纤 维素水解产生可发酵糖是该过程中最关键的一个步骤之一。酸法水解对设备要求高，副 产物对后续反应有抑制作用f71。而酶法具有条件温和、产品质量高、对环境友好等优点， 是纤维素糖化工艺今后的发展方向【81。本文从预处理，酶加入量，初始葡萄糖浓度等方 面考察了纤维素酶水解玉米秸秆的影响因素，对优化利用玉米秸秆为原料生产燃料乙醇 的工艺过程提供了基础数据。 l材料与方法 1．1材料 1．1．1 纤维原料 破预处理玉米秸秆(SbCSt)，中粮(肇东)生化能源有限公司提供。 1．1．2纤维素酶 杰能科；纤维素酶Mfcs，抚顺。 1．1．3仪器 射仪ⅨRD)，D／2500。 1．2方法 1．2．1纤维素含量测定 采用硝酸乙醇法【91。 1．2．2纤维素水解得率 按公式计算：还原糖含量×O．9／纤维素含量×100％【lo】。 1．2．3滤纸酶活 lmin内水解wateman No．1滤纸产生1“mol还原糖所需要的酶量，即定义为1个单 位酶活，按照IUPAC(国际理论和应用化学联合会)推荐的国际标准方法测定，以FPIU／，mL 表示【ll】。 l。2．4还原糖测定 采用3，5．二硝基水杨酸(DNS)法测定。 1．2．5葡萄糖含量测定 采用SBA．40型生物传感分析仪测定。 1．2．6含纤维原料结晶状况分析 采用X光射线衍射仪测定：Cu靶，波长1．54m，工作电压40kV，工作电流80mA， 扫描范围10(。)～70(。)。 1．2．7纤维素酶水解实验 在125 mL旋盖三角瓶中加入含纤维素底物，纤维素酶加入量为O．2 mL／g(以每g 底物计，没有特殊指出情况下使用泽生的1300型纤维素酶)，调节pH值至4．8，最终底 物质量分数为5-20％，然后在50℃下恒温振荡反应，取样离心，测定水解液中的葡萄 糖或还原糖浓度。 2结果与讨论 84 2．1纤维素含量 秆(SbCSt)中的纤维素含量，分别为36％，78％和45％。