菊花的组织培养1说课.ppt

菊花的组织培养 大多绿色开花植物都是靠种子繁殖。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 扦插 嫁接 压条 茎的营养繁殖方式 　　 指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 组织培养 1、细胞的分化 概 念： 在植物的个体发育中，细胞在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 。 一、植物组织培养基础知识 特 点： 原 因： 基因的选择性表达的结果。 结 果： 形成不同的组织和器官。 持久性、稳定性、不可逆性。 1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的韧皮部组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株。 思考 植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性。即已分化的细胞，仍具有发育成完整个体的潜能。 ，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础 2、细胞的全能性 ①定义： 细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 ②原理： 每个细胞都包含有该物种全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全部基因。 高度分化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质 已分化的植物细胞，仍具有全能性。 ③实例 受精卵 生殖细胞 体细胞 ④全能性的比较: 分化程度低的细胞 分化程度高的细胞 植物细胞 动物细胞 脱分化：离体的植物组织或细胞,在培育了一段时间后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织的过程。 再分化：脱分化产生的愈伤组织,再分化出根或芽等器官，这一过程叫作再分化。 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官 外植体： 脱分化： 再分化： 愈伤组织： 3、植物组织培养 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 植物组织培养的基本过程 二、影响植物组织培养的因素 1、植物材料的选择 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择：未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 2、培养基的配制 MS培养基主要成分包括： 大量元素: N、P、K、Ca、Mg、S等 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等 有机物:如氨基酸、烟酸、肌醇、维生素，蔗糖等 1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 此时的组织或细胞是离体的，不能体现其整个植物体的光能自养,细胞所生活的环境必需是液体有机物的营养环境。 　　1. 高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？ 思 考 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素 生长素类： 2，4－D、吲哚乙酸、萘乙酸、吲哚丁酸 细胞分裂素类： 激动素、6－苄基嘌呤、玉米素 3、植物激素的影响 ②生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞即分裂也分化 同时使用 分化频率高 生长素 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑制根的分化 生长素 细胞分裂素： ＝ 促进愈伤组织生长 ③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响 　　培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。 　培养过程中为什么需要进行光照？ 思 考 4、pH、温度、光照 pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日用日光灯照射12h ④过程: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 再分化 不需要光 需要光 二、实验操作 （一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备 1、配制各种母液 为了避免每次配制培养基都要称量几十种成