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考点十一 现代生物科技(选修3) 1.基因工程的工具包括限制性内切酶、DNA连接酶及运载体,最常用的运载体是质粒。 2.获取目的基因可通过如下三种方法:从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因及通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 3.基因表达载体的构建是基因工程的核心,一个基因表达载体的组成除目的基因外,还需启动子、终止子及标记基因等。 4.标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 5.目的基因的检测与鉴定可包括采用DNA分子杂交技术检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因;采用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA;通过抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质及通过个体生物学水平鉴定确认转基因生物是否被赋予了目的基因控制的生物学特性。 6.蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产、生活需求。 7.植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工控制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 8.进行植物体细胞杂交,必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,制备原生质体,再用物理法或化学法诱导细胞融合。 9.植物细胞工程的应用可包括植物繁殖新途径(微型繁殖、作物脱毒、人工种子制备)、作物新品种培育(单倍体育种、突变体利用)及细胞产物的工厂化生产等。 10.动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合及单克隆抗体制备等。 11.人们常将动物组织经胰蛋白酶消化后的初次培养称原代培养,将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理,然后分瓶培养称传代培养。 12.为保持正常的二倍体核型,目前使用或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的。 13.动物细胞培养的条件包括:无菌无毒的环境;一定的营养;适宜的温度(36.5±5℃)和pH(7.2~7.4);气体环境(95%空气+5%CO2,CO2的作用是维持培养液的pH)。 14.动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,该胚胎最终发育为动物个体。 15.单克隆抗体制备过程中涉及两次筛选,第一次是利用特定的选择培养基,排除未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞,只留下杂交瘤细胞;第二次是克隆化培养和抗体检测,获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 16.哺乳动物精子发生是从初情期开始的连续过程,卵细胞发生自胎儿期即形成初级卵母细胞,至初情期完成减数第一次分裂,至受精时完成减数第二次分裂。 17.当在卵细胞膜和透明带间隙观察到两个极体时,表明卵子已完成了受精,这是判断卵子是否受精的重要标志。 18.透明带反应及卵细胞膜作用分别是阻止多精入卵的第一、二道屏障。 19.囊胚的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,进行胚胎分割时需均分,滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘,可取滋养层细胞进行DNA分析及性别鉴定。 20.进行胚胎移植时,对供体母畜应注射促性腺激素,使其超数排卵;同时,对供体母畜和受体母畜需进行同期发情处理。 21.囊胚或桑椹胚阶段是胚胎移植的最佳时期。 22.试管婴儿与设计试管婴儿的最大区别在于后者需进行遗传学检测,而前者的目的是解决“不孕不育”问题。 23.生态工程的原理包括物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理及系统学、工程学原理与系统整体性(1+1>2)原理。 考点十二 生物技术实践(选修1) 1.20 ℃左右最适合酵母菌繁殖,酒精发酵时一般将温度控制在18~25℃。 2.随着酒精度的提高,红葡萄皮的色素进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色。 3.醋酸菌是一种好氧性菌,只有当O2充足时才能进行旺盛的生理活动,其最适生长温度为30~35℃。 4.当O2、糖源充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。 5.腐乳制作过程中盐、酒、香辛料均具防腐杀菌功能,其中酒含量宜控制在12%左右。 6.在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。 7.进行微生物培养时,虽然各种营养基的配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,倘若将尿素作唯一氮源,可筛选出尿素分解菌,倘若将纤维素作唯一碳源,则可筛选出纤维素分解菌。 8.纯化菌种的接种方法可包括平板划线法(工具为接种环)和稀释涂布平板法(工具为涂布器),后者可用于活菌计数。 9.在筛选纤维素分解菌的过程中,采用刚果红染色法,在培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。 10.菊花的组织培养,一般选择未开花

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