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手动进样器
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流路自上而下
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准备流动相
溶剂过滤
选择合适的滤膜
聚四氟乙烯滤膜:适用于所有溶剂,酸和盐,并无任何可溶物。
醋酸纤维滤膜:适用于水基溶剂,不适用于有机溶剂,推荐用于蛋白质和其相关的样品。
尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可用于强酸、70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺。
再生纤维素滤膜:具有蛋白质吸收低,同样适用于水溶性样品和有机溶剂。
注意:1,每张滤膜只能用一次。
2,水相和有机相不要搞混。
The Good User
溶剂的相溶性
溶剂信息
避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂:
卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。
高浓度的无机酸例如:硝酸和硫酸。
能够形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物。
含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。
在有机溶剂中的有机酸溶液。
含有强络合剂的溶液。
四氯化碳和异丙醇或THF混合液。
溶剂截止波长
溶 剂
UV截止波长(nm)
乙 睛
190
水
190
环 己 烷
195
己 烷
200
甲 醇
210
乙 醇
210
乙 醚
220
二氯甲烷
220
氯 仿
240
四氯化碳
265
四氢呋喃
280(220)
甲 苯
285
所以在使用紫外检测器时,所用波长应至少比所用溶剂的截止波长大20nm以上。
在使用紫外检测器时,所用波长与所用溶剂的截止波长接近(或低于截止波长)时,容易产生噪音干扰,从而影响检测结果。
生色团和最大吸收波长
生色团
分子式
实 例
最大吸收波长(nm)
羰基(酮)
RR‘C=O
丙酮
271
羰基醛
RHC=O
乙醛
293
羧基
RCOOH
醋酸
271
酰胺
RCONH2
乙酰胺
208
次乙基
RCH=CHR
乙烯
193
亚次乙基
RC=CR
乙炔
173
睛
RC=N
乙睛
160
硝基
RNO2
硝基甲烷
271
溶剂、PH、温度等都会影响生色团的最大吸收峰的强度和位置。
柱塞清洗附件Seal Wash
HPLC使用缓冲溶液Buffer时,由于缓冲盐溶液存在高压盐析现象,析出的细小盐粒会损伤蓝宝石柱塞杆和密封垫,从而造成漏液等故障现象,因而建议选配柱塞清洗附件Seal Wash。柱塞清洗附件Seal Wash部件号为01018-68722。
缓冲盐浓度大于0.01mol时,强烈建议选配在线的柱塞清洗附件Seal Wash。
清洗液配置:90%水+10%异丙醇溶液,流速为2-3滴/min。该混合液可抑制菌类生长和降低水的表面张力。清洗液虹吸流出,不能干涸。
仪器说明书
仪器的每一个模块都配有英文操作参考手册,中文手册也将会一CD形式寄给用户。
说明书中有详细的操作性能优化、故障提示、维护等内容。
希望认真阅读。
Agilent1100LC开机/关机操作
开机操作:
1,打开Seal Wash清洗液开关,调节流速为2-3滴/min。
2,打开计算机,进入Window操作系统,并运行CAGBootp srever程序。
3,打开1100LC各模块的电源,等待仪器自检完毕,1-2min。
4,双击桌面上“Instrument 1 Online”图标,进入1100化学工作站。
关机操作:
1,如果使用了缓冲溶液流动相应先用水冲洗系统30min。
2,用纯有机相冲洗系统30min。
3,在工作站上关闭各个模块。
4,退出工作站,关闭计算机。
5,关闭1100LC各个模块的电源。
6,关闭Seal Wash清洗液开关。
启动Bootp Server
进入Windows系统后Bootp Server自动运行,电击将Bootp Server窗口最大化,开启仪器电源后上面会出现七行通讯信息记录,表明工作站通讯成功,可以进入Agilent化学工作站。
注意:不能关闭Bootp Server窗口,只能最小化,否则将影响工作站通讯。
清洗阀Purge Valve
逆时针旋转打开清洗阀,清洗阀打开时,液体从废液管中流出,为清洗状态。
更换溶剂后,打开清洗阀,设置流量5ml/min,冲洗5-10min.
顺时针旋紧清洗阀为关闭状态,此时流动相由毛细管流向进样器.
逆时针打开清洗阀
顺时针关闭清洗阀
毛细管出口,流向进样器
废液管,清洗阀打开时溶剂由此流向废液瓶.
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