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酶免疫测定技术讲述
酶免疫测定技术
郭先锋
山西医科大学第二医院检验科
一.免疫凝集试验 二. 免疫沉淀试验
三.免疫电泳试验 四. 放射免疫试验
五.荧光免疫试验 六. 酶免疫试验
七.化学发光免疫试验
八.固相膜免疫分析技术
九.免疫组织化学技术
十.流式细胞分析技术
十一临床免疫检验的自动化
十二生物芯片技术(免疫测定的集成化和微型化)
免疫凝集试验
直接免疫凝集试验
玻片法 ? 试管法 ?
间接免疫凝集试验
类型
正向间接免疫凝集试验
反向间接免疫凝集试验
间接免疫凝集抑制试验
协同免疫凝集试验
常用的 间接免疫血凝试验 举例?
颗粒免疫凝集试验
胶乳颗粒凝集试验 举例? 明胶颗粒凝集试验 举例?
炭颗粒凝集试验 举例? 甲苯胺红颗粒凝集试验 举例?
直接凝集反应
玻片法:ABO血型鉴定
试管法:肥达试验
颗粒性抗原
抗体(凝集素)
正向间接凝集反应
如:类风湿因子的检测
可溶性抗原
载体颗粒
抗体(凝集素)
反向间接凝集反应
抗体
可溶性抗原
载体颗粒
免疫沉淀试验
液相免疫沉淀试验
絮状免疫沉淀试验
透射免疫比浊试验
散射免疫比浊试验
凝胶内免疫沉淀试验
免疫扩散试验(单扩,双扩)
免疫电泳技术(对流免疫电泳,火箭免疫电泳,免疫区带电泳,免疫固定电泳)
液相内沉淀反应
絮状沉淀反应
环状沉淀反应
如法医学血迹鉴定
+
+
—
—
抗血清
抗原
抗原
抗体
凝胶内沉淀反应
免疫扩散技术
免疫电泳技术
单向扩散试验
双向扩散试验
火箭电泳
对流电泳
免疫电泳
标记免疫技术
标记免疫技术:
将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物(常用标记物:放射性核素、荧光物质、酶、化学发光剂、胶体金等)进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定抗原抗体复合物中的标记物,这种免疫技术称标记免疫技术
标记免疫技术的分类
一、按测定用途分类:
1、免疫组化技术
2、免疫测定技术
二、按标记物分类:
1、酶免疫技术
2、荧光免疫技术
3、放射免疫技术
4、发光免疫技术
5、金免疫技术
主要的免疫标记物
类别 标记物 用途
荧光素 FITC、RB200、TRITC 免疫组化
镧系元素螯合物 免疫分析测定
放射性核素 3H、14C、32P、57Gr 免疫分析测定
125I、131I
酶 HRP、AP 免疫组化
免疫分析测定
化学发光物 Luminol、lucigenin 免疫分析测定
金属颗粒 胶体金、铁蛋白 免疫组化
免疫分析测定
放射免疫技术
酶免疫技术
发光免疫技术
三大经典标记技术
酶免疫试验
概述:
1. 将试剂抗原或试剂抗体用酶进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的酶,这种免疫技术,称为酶标记免疫技术。
2.分类:酶免疫组化技术
酶免疫测定技术 均相法
异相法 固相酶免疫试验
液相酶免疫试验
均相法:
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