高考生物冲刺复习：21基因工程幻灯片.pptVIP

专题21 基因工程 基因工程的诞生 知道各阶段的发现对基因工程的意义 基因工程的原理及技术 基因工程的原理和其中涉及的各种技术手段是选修三的高频考点 基因工程的应用 熟知基因工程在农业、畜牧业和生物制药方面的各种应用 蛋白质工程 熟知蛋白质工程的原理及其与基因工程的区别和联系 基因工程的工具 【典例1】(2011·浙江高考)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 【审题视角】解答本题需要明确以下几点： (1)理解(运)载体的来源、结构和特点。 (2)明确限制性核酸内切酶的作用。 【精讲精析】选C。具体分析如下： 选项 内容分析 A项正确 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒才能表达出腺苷酸脱氨酶 B项正确 要让目的基因与质粒形成重组质粒，两者必须用同种限制性核酸内切酶切割，所以每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C项错误 质粒作为(运)载体的条件之一是有多种限制性核酸内切酶的识别位点，但每种限制性核酸内切酶只有一个识别位点，只能插入一个目的基因(ada) D项正确 ada导入大肠杆菌成功的标志是表达腺苷酸脱氨酶，因此每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 【命题人揭秘】 命题规律：基因工程的工具是基因工程部分的重要考点，是理解基因工程的关键点之一。命题角度通常以具体基因与相应(运)载体的结合和导入受体细胞的过程作为切入点，全面考查限制性核酸内切酶、DNA连接酶和(运)载体的作用和组成。预测该考点多结合具体的生产应用与基因工程的具体过程相结合进行考查。 备考策略：基因工程的工具是进行基因工程操作的必要条件，在复习中应重点关注以下几点： (1)理解限制性核酸内切酶的作用特点，能根据信息写出限制性核酸内切酶切割后形成的末端。 (2)理解限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用对象都是磷酸二酯键。 (3)理解(运)载体的基本特点以及常用的(运)载体。 基因工程的操作程序 【典例2】(2012·福建高考)肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。 请回答： (1)进行过程①时，需用_________酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为__________。 (2)进行过程②时，需用_________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。 (3)研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取________进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_________(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。 【审题视角】解答本题的关键是： (1)注意目的基因和载体需用同一种限制性核酸内切酶切割。 (2)注意题干信息“let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制”，由此推出肺癌细胞增殖受到抑制的原因是let-7基因翻译抑制。 【精讲精析】(1)基因工程中目的基因和载体需要同一种限制性核酸内切酶切割产生相同的黏性末端，使目的基因与载体结合，载体中与RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子。 (2)原代培养产生的细胞需用胰蛋白酶处理，分散成单个细胞。 (3)检测目的基因是否转录需提取受体细胞中的RNA进行分子杂交；由图2可知 let-7基因翻译抑制则不能产生RAS蛋白，因此RAS蛋白减少，肺癌细胞的增殖就受到抑制。 答案：(1)限制性核酸内切(或限制) 启动子 (2)胰蛋白 (3)RNA RAS蛋白 【命题人揭秘】 命题规律：基因工程的操作程序是基因工程部分的主要内容，其核心是表达载体的构建。基因工程是选修3中最重要的考点。考查时，多通过具体实例全面考查对基因工程操作流程的理解程度。预测该考点的命题会以基因表达载体的构建为切入点，综合考查基因工程的操作和应用。 备考策略：分析近几年有关基因工程的操作程序的试题特点，不难看出经常以图形为载体，考查基因工程操作的具体过程和过程中相关概念的表达，试题考查内容较浅，记忆性的知识较多。复习时可从以下四个方面入手： (1)对关键内容进行对比、归纳，便于理解和记忆。如目的基因的导入方法，可采用表格归纳。 (2)要熟悉