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香蕉后熟果皮差异蛋白分析及其基因克隆的研究.pdf
热带作物学报 2012 , 33(6): 1057-1062
Chinese Journal of Tropical Crops
香蕉后熟果皮差异蛋白分析及其基因克隆的研究
李艳霞飞冯仁军 l 气张丽丽 1 , 2 ,张银东 1 川
1 海南大学农学院,海南海口 570228
中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所
2 农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室 海南海口 571101
摘 要 提取乙烯诱导香蕉后熟初期的果皮总蛋白和对照巢皮总蛋白,进行双向电泳实验,利用 ImageMaster 软
件找出乙烯诱导的香蕉果皮中的差异蛋白点 并且对差异蛋白进行质谱分析 选取一个可能为 E 类酸性几丁质
酶 (MaCHill )的蛋白进行后续研究。利用 MaCHill 的肤段信息在 NCBI 上比对后找到与该蛋白相应的核酸信息,
设计 PCR 反应引物,扩增 MaCHill 基因,得到~ DNA 全长序列。结果表明,该基因与 E 类酸性几丁质酶的同源性
为 99% ,可以初步确定这个基因为 E 类酸性几丁质酶基因。
关键词 香蕉;后熟;乙烯诱导;差异蛋白;几丁质酶基因
中国分类号 5668. 1 文献标识码 A
Analysis of DifTerentially Expressed Proteins and the
Gene Cloning in Ripening Banana Peel
1
11 Yanxia\ FENG Re时 un 1 , 2, ZHANG Lili1,2, ZHANG Yindong , 2
1 College 01 Agronomy , Hωnan University, Hoikou, Hoinan 570228, China
2 Key Lahorat町 01 the Ministη 01 Agriculture , Ch阳 se Ac础 my 01 Trφ, ic a1 Agricultura1 Scienc 叫
/nstit 脚 01 Tropica1 Biosciences ond Biotechnology, Hω, ko u, Hoinan 57/10/, China
Abstract Differentially expressed proteins were isolated by the two -dimensional (2D) gel electrophoresis , and
analysed by the Image Master software , and identified by the mass spectrometry , after the extraction of the total
protein of the control and the ethylene-induced early-ripening banana peel. A putative chitinase m (MaCH m)
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