李善刚《医学实验动物学》06第九章 动物实验的基本技术和方法.pdfVIP

第九章 动物实验的基本 技术和方法 第一节 动物实验前的准备工作 一、动物实验的设计 二、实验动物的正确选择 种属、品系、性别、年龄、数量、微生物学级别 例：实验动物生产许可证： SCXK（沪）2009-0021 实验动物质量合格证 三、动物实验场所的确定 例：实验动物使用许可证：SYXK（沪）2013-0026 四、实验动物的订购、运输；验收与检疫 运输与包装的注意点：温度控制、符号级别的包装 核对与验收 （实验动物质量合格证 ） 普通级动物与随意来源动物的隔离与检疫 动物实验前须引起重视的事项 1.动物福利和动物实验伦理问题 ? 饲养繁殖实验动物的目的是用实验动物作为 人类的替身进行各种生物医学研究。 ? 一方面随着生物医学的发展，实验动物的使 用量逐年增加，使用种类也逐年扩大； ? 另一方面从动物福利和动物实验伦理学考虑， 又需要减少一些不必要的动物实验，特别是 人类的宠物诸如猫、犬、猴等，或者在不得 不做的动物实验中尽可能将动物的痛苦、压 迫和不适降到最低。 ? 国际上对动物实验伦理的要求: ⑴动物居住空间应符合标准,注意日常的饲育 管理,不使动物陷入饥饿、缺水和患病。 ⑵尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。 ⑶在必须使用犬、猫和猴时，在实验前应进行 训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。 ⑷实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐 死。 ⑸要爱护动物和对由于实验死亡的动物应持有 怜悯和感谢之情。 ★我国2006年9月13日，科技部颁布了《关于 善待实验动物的指导性意见》 2. 动物实验技术和方法是实践性非常 强的，不能仅靠书本理论知识，需要 通过反复实践加以掌握。 目的： ? 保证实验的顺利进行。 ? 减少动物所承受的痛苦。 动物实验前具体准备的细节事项 1.所用实验动物的品种、品系、性别、数量等能 否得到 2.所用动物实验设施是否符合本实验要求 普通设施，SPF设施，感染性设施，有毒有害 供试品设施，放射性设施、实验室、手术室 3.所需要的动物实验技术是否熟练掌握所用动物 实验器具、试剂是否准备好 4.预实验 正式实验前的演习 预实验可用少量动物进行 预实验结果不能并入正式实验结果一起分析。 第二节 动物实验的基本操作技术和方法 一、动物的抓取 ? 动物的抓取是顺利进行各项动物实验操作最 基本的一个环节。 ? 应熟练掌握各种实验动物的抓取方法，用轻 柔的手法把对动物施加的恐惧和痛苦降到最 低。 ? 一般说来动物是不会主动攻击人的。 1. 小鼠抓取的注意点 2. 大鼠抓取的注意点 3. 豚鼠抓取的注意点 4. 兔抓取的注意点 ? 最好戴人造革围裙和袖套，以免爪子抓伤。 ? 采用正确地抓取方法。 ? 可采用兔固定器固定进行实验操作，或一人抓取固 定，一人实验操作。 5. 犬抓取注意点 ? 实验用犬有专用的比格犬和农村收购来的随意 来源犬。 ? 犬是通人性的，随意来源犬购入后，饲养人员 和实验人员要经常亲近它们，使它放松对你的 警惕，容易直接抓取它们。 ? 不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造成的伤害会使 它对你更加恐惧，影响以后实验的进行。 ? 抓取后用绳子将嘴绑住。 二、动物编号常用的标记方法 ? 适用需要个体识别的实验 1. 染料标记法：适合白色被毛的动物，如小 鼠、大鼠、豚鼠、兔等。 黄色：常用3-5%苦味酸溶液 红色：常用0.5%中性红溶液 咖啡色: 2%硝酸银溶液 黑色：煤焦油酒精溶液 优点：简单、易识别 缺点：长期易退色；不能编大号码。 2. 剪耳（打孔）法：啮齿类小动物 3. 号码钳法：适用于兔、犬等大动物 4. 耳牌法：适用于羊、牛等大家畜 5. 电子芯片植入法： 三、动物被毛的去除方法 1. 剪毛法：用弯头剪逆毛方向剪 适用于各种实验动物 2. 拔毛法：常用于兔的耳缘静脉注射 3. 剃毛法：专用剃毛刀 适用于大动物 4. 脱毛法：脱毛剂 ? 常用脱毛剂