- 1、本文档共31页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
抗菌药物筛选实验方法和技术教案[8)
综合化学实验-化学生物学专题实验;一个新的化合物或分离提取有效成分是否有抗菌作用,需要药理实验来证实,首先采用体外实验方法,观察试验物对细菌有无杀灭作用或抑制作用,体外实验的重要性在于方法简便,用药量少,短时间内能判断药物抗菌的广度和强度,为深入体外实验和体内药效研究提供数据。
体外实验是筛选抗菌药物或测试新药抗菌性能的重要环节。药物对细菌代谢的影响、可以使细胞呼吸量减低,或酶系统受到抑制等,因而出现细菌不生长或部分抑制,可借以判断药物对细菌有无抗菌作用,或抗菌范围。体外实验是细菌与药物直接接触,没有机体诸因素参与,故体外和体内实验的结果不一定完全一致,需两方面综合分析进行评价。;一、实验目的;二、微生物培养基的配制、灭菌与培养;(一)基本原理;(二)实验过程;2,培养基的分装
液体培养基装入试管培养基的量视试管大小及需要而定,若所用试管大小为15×150 mm时,液体培养基可分装至试管高度1/4左右为宜(约5ml);
分装团体培养基时,在琼脂完全融化后,应趁热分装于试管中分装量为管高1/5(约4-5ml)。;3,棉塞的制作及试管、锥形瓶的包扎
(1)试管棉塞的制作
制棉塞时,应选用大小、厚薄适中的普通棉花一快,铺展于左手拇指和食指如成的圆孔上,用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞,然后直接压入试管或锥形瓶口。 将装好培养基并塞好棉塞或盖好管帽的试管捆成—捆,外面包上一层牛皮纸。用铅笔注明培养基名称及配制日期。灭菌待用。;4,培养基的灭菌
高压蒸汽灭菌是微生物学实验、发酵工业生产、以及外科手术器械等方面最常用的一种灭菌方法。
(1)打开灭菌锅盖,加适量水;
(2)将待灭菌物品放入灭菌桶内。(3)将盖上的软管插入灭菌桶的槽内,加盖,上下螺栓口对齐,均匀旋紧螺栓,使锅密闭。
(4)打开放汽阀,加热,自锅内开始产生蒸汽后再关紧放汽阀,待压力逐渐上升至所需温度时,控制热源,维持所需压力和温度,并开始计时20 min后停止加热。
(5)待压力降至接近0时,慢慢打开放汽阀(排汽口),开盖,立即取出灭菌物品。;5,斜面和平??的制作
将巳灭菌装有琼脂培养基的试管,趁热置于木棒上,使成适当斜度,凝固后即成斜面(图1-3)斜面长度不超过试管长度1/2为宜。;平板的制作 ;6,斜面培养基接种
斜面培养基接种法一般不用作分离培养,仅使细菌繁殖为菌种传代或观察其某些生化特性之用。
(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞。;7,液体培养基接种法;三、微量稀释法体外抗菌实验;(一)实验过程;筛选实验过程;96孔细胞培养板加样安排;试验用样品;筛选数据分析;筛选数据分析;(4)最小抑菌浓度或EC50的测试 ;样品稀释后的浓度表;(二)数据处理与分析;
2,实验中,不同稀释的样品浓度的测试结果没有上面的现象,而是出现规律性的上升。即,这种样品测出的数据是随着样品浓度的下降而上升,可以根据其数据画出一条细菌的生长曲线,如果对照样的值定为100%,可以从曲线上求出抑制50%时样品的浓度,所以,我们称这种 抗菌为抑菌作用,表明该化合物不能杀死细菌,但可以抑制其生长。;四、琼脂扩散法;图:标准曲线法 图 :链霉素标准曲线 双碟、钢管与抑菌圈位置图S:标准品T:供试品 抑菌圈直径(mm);(一)滤纸片法实验过程;Evaluation only.
Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0.
Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;效果评价;四、实验安排;五、实验注意事项
您可能关注的文档
- 快乐寒假解答[物理)3.ppt
- 快速记忆英语单词教程[8).ppt
- 快速阅读作题方法.ppt
- 态度篇:作1个有价值的人.ppt
- 怀化职业技术学院咯砸味营销策划[8).ppt
- 怎样作到文章节富有文采.ppt
- 怎样作到科学睡眠ppt.ppt
- 怎样作好作业长[1)1.ppt
- 怎样作好个人职业生涯规划[1).ppt
- 怎样作好的管理工作20130321.ppt
- 江苏省灌云高级中学2023-2024学年高三上学期第一次月考地理试题含答案.docx
- 备战2024年高考物理一轮重难点复习 第十三章 近代物理.docx
- 江苏省高邮市一中2021-2022学年高三上学期第一次月考语文试题(原卷版).docx
- 江苏省华罗庚中学2023-2024学年高三上学期12月阶段检测数学试卷含答案.docx
- 江苏省海门中学2023-2024学年高三上学期第一次调研考试地理试题及答案.docx
- 备战2024年高考物理一轮重难点复习 第九章 恒定电流.docx
- 江苏省高邮市2023-2024学年高三下学期3月学情调研数学试题含答案.docx
- 备战2024年高考物理一轮重难点复习 实验十一:探究影响感应电流方向的因素.docx
- 备战2024年高考物理一轮重难点复习 实验三:验证平行四边形定则.docx
- 备战2024年高考物理一轮重难点复习 第十四章 光.docx
文档评论(0)