2016-2017学年苏教版选修1制备和应用固定化酶学案.docVIP

第二节　制备和应用固定化酶 学习目标重点难点1.能记住固定化酶的概念。 　　2．能说出常见几种制备固定化酶的方法。 　　3．能记住固定化细胞技术的概念。 　　4．能说出常见细胞固定化的方法。　　重点： 能分析比较常见几种固定化酶的方法的优点及缺点。 难点： 　　1．制备固定化酵母菌细胞的流程。 　　2．说出固定化细胞及酶在实际中的应用。 一、固定化酶技术的应用 1．固定化酶 固定化酶是指用______或______的方法将酶与__________结合在一起形成的仍具有________的酶复合物。在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被__________。 预习交流 1．直接使用的酶能反复利用吗？ 2．任何一项新技术有利，也必有弊。固定化酶是将酶固定在不溶于水的载体上的一项新技术，由该特点你是否想到了固定化酶??不足？能否结合过氧化氢酶对过氧化氢的分解实验对固定化酶的不足之处进行解释说明？ 2．制备固定化酶的方法 项目吸附法交联法包埋法方法利用物理吸附、离子键作用利用多功能试剂进行酶与载体之间交联包埋在固化的载体中载体________、________、__________、离子交换树脂等戊二醛凝胶方式____________________—包埋成格子型微胶囊型预习交流 在固定化酶的三种方法中，酶不适合哪种方法？ 二、固定化细胞技术的应用 1．固定化细胞技术 通过各种方法将______与一定的载体结合，使其仍保持原有的__________，这一过程称为____________。 2．细胞固定化的方法 细胞固定化的方法也有多种，主要有________和________两大类。 ________是制备固定化动物细胞的主要方法，此法也可制备固定化植物细胞，它既可将植物细胞吸附在__________的大孔隙或裂缝之中，也可将植物细胞吸附在__________的外壁上。 包埋法是指将细胞包埋在______________中，其中，__________是应用最广泛的细胞固定化方法，它所使用的载体主要有________、__________和______等。固定化细胞技术有许多优点，可以取代____________进行发酵，生产各种物质。 预习交流 1．固定化细胞的实质是固定酶，那么是胞内酶还是胞外酶呢？ 2．固定化细胞技术固定的是活细胞还是死细胞？ 答案：一、1.物理　化学　固相载体　酶活性　反复利用 预习交流： 1．提示：不能，混在产物里难以回收利用。 2．提示：将酶固定在不溶于水的载体上，限制了酶分子与底物分子（或离子）的接触，减少了酶与底物的接触面积，降低了化学反应的速度。例如，用肝脏研磨液（内含过氧化氢酶）分解过氧化氢就比用成块的鲜肝分解过氧化氢的速度快，因为成块的鲜肝过氧化氢酶大部分存在于肝细胞内，与过氧化氢的接触面积小，不利于过氧化氢的分解，而肝脏研磨液将过氧化氢酶从肝细胞内释放出来，增加了过氧化氢酶与过氧化氢分子的接触面积，使反应更容易进行。 2．纤维素　琼脂糖　多孔玻璃　物理吸附、离子结合法、共价键结合 预习交流： 提示：酶不适合用包埋法，因为酶分子太小容易从材料中漏掉。 二、1.细胞　生物活性　细胞固定化 2．吸附法　包埋法 吸附法　泡沫塑料　中空纤维 能固化的载体　凝胶包埋法　琼脂糖　海藻酸钠 明胶　游离的细胞 预习交流： 1．提示：胞外酶。 2．提示：活细胞。 在预习中还有哪些问题需要你在听课时加以关注？请在下列表格中做个备忘吧！我的学困点我的学疑点 一、固定化酶技术的应用 1．固定化酶的概念 指用______________的方法将酶与__________结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。 2．固定化酶的方法 （1）填写下列固定化酶的方法 A________　B________　C1__________　C2__________ （2）吸附法是把酶固定在________、________、__________等载体上。 （3）交联法最常用的交联剂是________。 （4）包埋法最常用的载体是______。 （5）这三种方法中包埋法适合较大的酶分子还是较小的？原因是什么？ 3．固定化酶是否可以永远地利用下去？ 下列关于固定化酶的说法中，错误的是（　　）。 A．固定化酶的活力也受强酸、高温等因素的影响 B．酶固定化后会使酶的利用率提高 C．利用固定化酶可降低生产成本 D．反应结束后，固定化酶与产物混合成为杂质 1．酶的共性及固定化酶的优点 （1）酶：起催化作用，绝大多数是蛋白质。 （2）酶的活力在受高温、强酸、强碱和重金属离子等外界条件影响下变性失活。 （3）普通酶促反应的缺陷：①一次性使用难回收