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第二节 分子生物学技术
学习目标重点难点 1.能记住PCR技术的概念。
2.能说出PCR的大致过程。 重点:
会分析生物体内DNA复制与PCR技术的区别。
难点:
能运用PCR的原理解决日常生活中的实际问题。
一、分子生物学进展
1.______________________的建立,奠定了分子生物学的基础。
2.____________________具有重大作用和深远意义。
3.原核生物、真核生物的细胞已被用于大批量生产________、________等外源蛋白。
4.____________也可以作为天然的生物反应器,用于生产新的或改造过的基因产物。
5.我国自1986年提出________计划至今,在生物技术方面已取得了一系列突破性进展,许多成果已转化为生产力。
预习交流
分子生物学近年来进展神速,你了解其在我国农业生产中应用的现状吗?
二、PCR技术
1.概念:PCR又叫______________,是一种体外迅速____________或__________的实验技术。
2.原理:遵循______________原则。
3.条件:模板:__________;
酶:____________;
原料:__________的脱氧核苷酸;
引物。
4.过程:PCR一般要经过________循环,每一次循环都可以分为______、______、______三步。
5.结果:按____进行指数式扩增。
预习交流
1.DNA分子由两条脱氧核苷酸链组成,和亲代DNA分子相比,子代DNA的两条链有何特点?
2.回忆并简述DNA的复制过程。
3.PCR的变性过程实质上也是解旋,PCR的解旋和细胞内的DNA解旋有何不同?
4.PCR技术有何应用?
答案:一、1.DNA分子双螺旋结构模型
2.DNA重组技术和基因克隆
3.胰岛素 干扰素
4.植物与动物 “863”
预习交流:
提示:我国已成功培育出转基因水稻、大豆、小麦、棉花、番茄、烟草等品种,其中的一些已经被批准进行大田试种和种植,如抗虫棉。
二、1.聚合酶链式反应 扩增特定基因 DNA序列
2.碱基互补配对
3.两条母链 DNA聚合酶 4种游离
4.三十多次 变性 退火 延伸
5.2n
预习交流:
1.提示:构成子代DNA的两条链一条链是亲代DNA的链(母链),一条链是新合成的链(新生链),这种复制叫半保留复制。
2.提示:DNA分子首先在解旋酶的作用下解旋,然后以解开的每一段母链为模板,在DNA聚合酶等酶的作用下合成与母链碱基互补的一段子链,随着模板链解旋过程的进行,新合成的子链也不断延伸,同时,每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。
3.提示:PCR在高温条件下(90~100 ℃)解旋,而细胞内的DNA在解旋酶的作用下解旋。
4.提示:基因克隆、DNA序列测定、遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学。
在预习中还有哪些问题需要你在听课时加以关注?请在下列表格中做个备忘吧!我的学困点我的学疑点
一、PCR技术的原理及条件
1.细胞内DNA复制需要的基本条件有哪些?该条件在DNA复制中起何作用?
2.DNA复制过程为什么需要引物?哪种物质可以作为引物?
3.讨论:DNA合成的方向有什么特点?两条子链的合成起始于DNA的同一端吗?
4.在DNA复制时,双链的解开是进行DNA复制的前提,在体外如何使双螺旋结构打开呢?
5.由于PCR过程的温度很高,导致DNA聚合酶失活,人们是怎样解决这一问题的呢?
6.PCR扩增需要哪些条件呢?
1.美国科学家莫里斯发明的PCR技术,是一种DNA分子“复印机”,它可以在数小时内将一个DNA分子复制出1千亿个,解决了检测样本扩增的难题。在人类基因组计划实施中,PCR技术使每个核苷酸的识别成本降至5~10美元。莫里斯因发明PCR技术荣获了诺贝尔奖。
(1)DNA分子在复制时需要大量的______________作原料,在DNA聚合酶的催化下利用解旋后的单链为________,进行生物合成。
(2)在DNA分子解旋时必须加热,普通的酶容易________________,莫里斯从温泉中找到了耐95 ℃高温的__________,解决了酶重复使用的难题,使链式反应成为可能。每次循环可以分为________、________、________三步。
(3)高温酶的发现与应用说明了地球生物____________的重要,大自然的________库是人类的宝贵财富。
2.下图是PCR体外扩增DNA过程中哪次循环的产物?( )
A.第一次循环 B.第二次循环 C.第三次循环 D.第四次循环
1.PCR技术与体内DNA复制的比较
体内复制PCR反应不同点解旋在解旋酶作用下,细胞提供能量,部分解开加热至
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