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第一节 微生物的分离和培养;1.了解有关培养基的基础知识;
2.掌握无菌操作技术;
3.了解纯化大肠杆菌的基础知识。; 19世纪中期,法国的酿造业在生产过程中,出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。 ; 微生物是结构简单、形体微小,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。
今天我们就以大肠杆菌为例学习微生物的培养与分离。;1.特点:结构都相当简单,个体多数十分微小,通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构,且体内一般不含有叶绿素,不能进行光合作用。;2.微生物包括五类; 培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。;
固体培养基 液体培养基 半固体培养基;2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;3.培养基内所含的基本物质;4.培养基的用途;1.无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
无菌操作是培养微生物成功的关键!;(1)消毒定义:;a.灼烧灭菌;b.干热灭菌:
160-170℃ 下加热1-2h。
c.高压蒸气灭菌:
100kPa、121℃ 下维持15-30min.;;;配制培养基;;包器材;包器材;;高压锅灭菌条件:
121℃(1kg/c㎡)
气压100kPa
20min;;摇床震荡培养12h(于LB液体培养基中);;倒平板;;接种;烧至暗红;划线;分离后,一个菌体便会形成一个菌落,这是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选菌株的最简便方法之一。;1.关微生物营养物质的叙述中,正确的是( )
A.是碳源的物质不可能同时是氮源
B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐
D.无机氮源也能提供能量;解析:A、B选项的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源;有的碳源可同时是氮源;有的碳源同时是能源;有的碳源同时是氮源,也是能源。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。;2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是( )
A.防止杂菌污染
B.接种前菌种要进行灭菌
C.培??基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前;退出
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