2016-2017学年苏教版选修1生物成分的分离与测定技术学案.docVIP

第一节　生物成分的分离与测定技术 学习目标重点难点　　1.能说出蛋白质分离与纯化的方法。 2．能说出蒸馏法提取植物芳香油的过程。　　重点： 1．能看懂电泳条带并进行分析。 2．能分析蒸馏装置中各部分的作用。 难点： 能解决日常生活中的实际问题。 一、蛋白质的粗分离 预习交流 分离蛋白质抽提出来的粗提取物还要进行离心。离心的目的是什么？ 二、蛋白质纯化的原理与方法 1．原理 根据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间的差异纯化。这种差异主要包括：__________、________、所带电荷的多少、__________等方面。 2．方法 （1）透析法：利用蛋白质分子不能透过________的特性，分离出______________。常用的半透膜有______________、________等。 （2）离心沉降法：主要通过控制________，使得__________、______不同的蛋白质发生沉降分层。 （3）电泳法：带电颗粒在________作用下向着与其电性______的电极移动的现象。 预习交流 透析与离心的目的是什么？ 三、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的操作 1．原理 血清蛋白包含一组蛋白质，其____________、______、______________________各不相同，在电场作用下会发生______。 2．操作流程 配制试剂→____________→浸泡薄膜→__________→________→__________→______→漂洗→脱色 3．实验结果分析 呈现5条蛋白质色素带，从点样处一侧开始，依次是：________蛋白、______蛋白、________蛋白、__________蛋白和______蛋白。 预习交流 电泳技术有多种，你了解的电泳的常用方法有哪些？ 四、从生物材料中提取某些特定成分 预习交流 1．所有的芳香油都适合用蒸馏法吗？ 2．芳香油的提取除了蒸馏法和萃取法外，还有哪种方法？ 答案：课前预习导学 一、1.研磨法　超声波法　酶解法　不同特性　抽提　稀碱性　透析液　有机溶剂 预习交流： 提示：离心的目的是去除固体杂质。 二、1.分子大小　溶解度　吸附性质 2．（1）半透膜　小分子化合物　动物的膀胱膜　玻璃纸　（2）离心速率　分子大小　密度　（3）电场　相反 预习交流： 提示：透析的目的是除去样品中相对分子质量较小的杂质。 离心的目的是让不同分子质量的物质进行分层。 三、1.颗粒的大小　形状　所带净电荷的多少　分离 2．架滤纸桥　细心点样　平悬薄膜　实施电泳　染色　 3．γ球　β球　α2球　α1球　清 预习交流： 提示：常见的有琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。 四、挥发性　有机溶剂　蒸馏法　萃取法　水蒸气蒸馏装置　旋转薄膜蒸发器 预习交流： 1．提示：不是，具体适合采用哪种方法要根据植物原料的特点决定。 2．提示：压榨法。 在预习中还有哪些问题需要你在听课时加以关注？请在下列表格中做个备忘吧！我的学困点我的学疑点 一、蛋白质的分离与纯化 1．分离生物大分子的基本思路是什么？ 2．蛋白质的分离和提取的原理是什么？ 3．电泳大多是在固定化的介质中将样品放入流动相中进行分离。固定化的介质有哪些？ 4．电泳方法（填写空白内容） 琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳由于琼脂糖本身不带电荷，各种分子在电场中迁移速率决定于______________的差异及分子的______、______不同在凝胶中加入SDS，使蛋白质解聚成单链，与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，使其迁移速率完全取决于________________________5.泳动速度取决于什么？ 不同的生物分子在电场的作用下，其运动方向及速度不同。下列有关影响生物分子电泳运动速度的说法，错误的是（　　）。 A．所带电荷越多，运动速度越快　　B．分子颗粒越大，运动速度越慢 C．电场强度越大，运动速度越快　　D．越接近于球形，运动速度越快 1．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的注意事项 （1）保持醋酸纤维薄膜的清洁，避免用手直接接触薄膜。 （2）点样量要适量，两次左右即可，盖玻片的边缘应避免出现明显液滴。点样要尽量在一条直线上。 （3）电泳时间不低于1 h。 （4）点样处不要搭在滤纸上，以免血清渗入滤纸。 （5）醋酸纤维薄膜绷直，避免电泳槽隔离板的干扰。 （6）不可同时接触正负极，防止触电。 （7）为了使电泳槽内维持饱和蒸汽压，以免醋酸纤维薄膜在电泳过程中因电流通过发热而变干，所以要盖上盖子进行电泳。 2．分离蛋白质的另一种方法——凝胶色谱法 （1）原理 （2）凝胶色谱法的实验操作 ①蛋白质的提取和分离步骤 样品处理 B． C．纯化：凝胶色谱法 D．纯度鉴定：SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 ②凝胶色谱