耐辐射异常球菌渗透诱导蛋白基因osmC的克隆表达纯化及生物信息学分析.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 绵 阳师范学 院学报? ???．??? ??．?? ????年 ?月? ?????????????????????????????????? ???．，????? 耐辐 射 异 常球 菌 渗 透 诱 导 蛋 白基 因 ????的? 克 隆 表 达 纯化 及 生 物信 息 学分 析? 崔广艳? ，鲜先毅? ，刘盈盈?，代 其林?，王? 劲? ，杜世章?，? ??。西南科技大学生命科学与工程学 院 ，四川绵 阳 ??????；?．中国农业 科学院生物技术研究所 ，北京 ??????；? ?．绵阳师范学院生命科学与工程学 院，四川绵阳 ???????? 摘 要 ：耐辐射异 常球 菌??．???????????????????基 因???一?????编码 的渗透诱 导胁迫蛋 白是 一种在氧 化? 胁迫中起 重要作 用的过 氧化 物酶．用 ???方法从耐辐射异常球菌 中扩增 出 ????基 因的全长序 列???????，采 用原? 核表 达 系统对其进行表 达纯化 ，获 得 了分子量 大 小约为 ??．?????的带 有 ???标 签 的融 合蛋 白．利 用在 线 网站 对? ????蛋白的生物信息学分析 ，结果表 明：????蛋 白由 ???个氨基酸组成 ，理论等 电点为 ?．??，为 亲水性 蛋 白；二级? 结构主要是由 ?／．一螺旋及 不规则卷曲组成．????蛋 白的纯化及 生物信息学分析 为后续深入研 究其功能奠定了基础．? 关键 词 ：耐辐射异常球 菌 ；????蛋 白；表达纯化 ；生物信 息学分析? 中图分类号 ：????? 文献标识码 ：?? 文章编号 ：????????????????????????? ?? 引言? 在逆境条件下 ，生物体内会产生过氧化物 ，过氧化物具有很强 的毒性 ，能损害细胞 内的大分子物质 ，如? ???、膜脂和蛋 白质分子? ．因此 ，消除过氧化物对细菌存活和增殖非常重要．过氧化物还原酶被认为在细? 菌抵抗有机或无机过氧化反应的过程中起重要作用．不同种类的过氧化物还原酶有一个共 同的作用机制 ：? 利用活性巯基来还原过氧化物为它们相对应的乙醇和水 ，由 ?????和 ????来提供电子．????、???、???? 和 ????是 四种 研究 最多 的过 氧化 物还原 酶 ，这 四种酶 的底物 选 择 ，调 节行 为 和 生 理学 作 用 的不 同 主要 取? 决于物种? ．其中有机氢过氧化物抗性蛋 白?????、渗透胁迫诱导蛋 白??????以及许多其他未知的蛋白质? 都属于 ????超家族．? 耐辐射异常球菌 ??．???????????????最初 是 由俄 勒 冈州的 ????????等人分 离于? 辐照 的 肉罐头? 中? ，它抵抗氧化胁迫对细胞大分子损伤的能力超过了 目前已知的所有物种??．耐辐射异常球菌对所有? 产生活性氧