重组人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A蛋白的可溶性表达、纯化和对肿瘤细胞的抑制活性.pdfVIP

山东科学? 第 ??卷 第 ?期 ????年 ?月出版? ????????????????? ???．?????．?????．????? ???：??．????／?．????．????— ????．????．??．???? 重组 人促 性 腺激 素 一铜绿 假 单胞 菌 外毒 素 ?蛋 白的? 可溶 性表 达 、纯 化 和对 肿 瘤细 胞 的抑制 活 性? 郭凯 ，赵 晓燕 ，周红姿 ，陈凯 ，李 纪顺 ，陈泉 ，杨合 同? ?山 东省科学 院中 日友好生物技术研 究中心 ，山 东省应 用微 生物重点 实验 室，山东 济南 ???????? 摘要：以人促性腺激素 一铜绿假单胞菌外毒素 ?衍生物???????????????为研究对象，根据大肠杆菌密码子偏好性优? 化 ，通过基 因合成的方法获得 重组蛋 白核 酸序 列，连接至 ???????载体 中，并转化入大肠杆 菌 ?????????及 ?????? ????????中进行诱 导表达。结果显示 ，在含有 ????／??葡萄糖 的 ??培 养基 中 ??℃培养 至 ?????约为 ?．???，加入? ?．???????????在 ??℃诱导 ???后 ，重组蛋白可以实现可溶性 高表达。工程菌经超声波破碎 、高速 离心后 ，经镍柱纯化? 和脱盐后得到重组蛋白，蛋 白纯度达到 ??％以上，蛋白最终得率在 ?．????／?茵体。重组蛋白经 ???。检测 ，可以较好地抑? 制 肿瘤 细胞株 的 生长 。? 关键词 ：人促黄体激素释放激素；绿脓杆菌外毒素 ?；可溶性表达 ；表达菌株? 中图分类号 ：????? 文献标识码 ：?? 文章编号：???????????????