共价结合法固定化酶活性载体的研究进展.pdfVIP

生物 技术 世界 生命科学 共 价 结 合 法 固 定 化 酶 活 性 载 体 的 研 究 进 展 郎伟超 张丽 (南京理工大学环境与生物工程学院 江苏南京 210094) 摘要:共价结合法已经成为酶固定化的最主要的方法之一,载体在酶固定化技术中发挥着关键作用。论文对近年来国内外共价结合法固定化酶活 性载体的研究发展状况进行了综述,包括含有酰基叠氮、酸酐、卤素、乙酰基、聚碳酸酯、苯酚的聚合物的研究与应用。认为开发新型改性复合载 体将成为今后研究的重点。 关键词:固定化技术 共价结合 载体材料 酶 中图分类号:Q814.2 文献标识码:A 文章编号:1674-2060(2013)10-0001-01 酶的共价结合固定化是通过共价键把酶连接到带有惰性基团 在此后的20年里, 机会没有这类聚合物被用于固定化酶的报道。 或者活性基团的载体上。共价结合法已经成为酶固定化的最主要的 黄家贤等人[ 4] 以乙烯撑碳酸酯为聚合单体, 以亲水性N, N’- 亚 方法之一。其原理非常简单, 用预先设计好的, 带有活性基团的不溶 甲基爽烯酰胺为交联剂, 分别用N- 乙烯基吡咯 烷酮和丙烯酸- β- 性载体, 在适宜的条件下与氨基酸发生反应, 形成共价键。 羟已酯两种亲水性单体作为酶载体的成分, 通过反相悬浮聚合, 合 20世纪60年代, 研究发现, 预先制备好的载体不仅仅是作为支撑 成了两种性能较好的载体, 它们够快速与酶反应, 并且酶活力良好。 酶的骨架, 还可以使酶的性质( 如稳定性、活力和选择性) 发生改变。 Di ng LH等人发现, 聚碳酸酯是可溶性的均聚物, 通过交联可 以得到不溶性的球状载体, 可以用于固定胰蛋白酶。酶的固定量达 1 活性载体的合成 到0. 25。但是, 酶的活力回收率却低于15%。原因可能是反应基团的 活性载体是指具有活性基团, 在适当条件下, 能直接与酶结合 密度升高或者是扩散阻力增大而导致酶的活力下降。湿载体的最大 的聚合物。因此, 聚合物中应该至少有一种单体含有活性基团, 该基 固定化量为0.